一种气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法及其培养基
1.本发明涉及食用真菌培养领域，尤其是采用气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法及其培养基。
技术背景
2.灵芝，我国传统中药，著名药食两用菌。子实体含有多糖、三萜类化合物等次生代谢产物，具有抗氧化、降血糖、免疫调节等功效。目前获得灵芝次生代谢产物的主要方式仍是从子实体中提取，子实体则主要通过传统栽培方式获得，而传统栽培方式因生长周期长、易染菌、生长不均一等缺点阻碍灵芝的开发与发展。
3.灵芝液体深层发酵可在短时间内获得大量优质、菌龄统一的灵芝菌丝体及次生代谢产物，相比传统栽培方式具有操作简便、周期短、生产效率高等特点，可明显缩短生产周期、减少着地面积、减少生产成本。研究表明，采用灵芝液体深层发酵获得的灵芝菌丝体及次生代谢产物同样具有与子实体获得的具有相同的药理作用，且一些发酵产物也具有对机体的正向调节作用，无论是发酵产物提取灵芝次级活性物，还是发酵产物处理后的应用都具有广阔的应用价值。
技术实现要素：
4.本发明提供一种气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法及其培养基，该培养方法可配合该培养基满足灵芝菌丝体可降低生产成本、提高生产效率、增加灵芝菌丝体产量。为达到上述目的，采用以下手段。
5.培养基成分选择上，粉丝下脚料、木耳菌糠仍包含丰富的营养物质，可满足灵芝菌丝体生长的营养需求，且降低成本，增加废料利用率。培养方法上，首先制备液体种子阶段，采用咖啡搅拌器将成球的菌丝体打碎可增加灵芝生长点，且操作方法简单，染菌率低。发酵罐培养阶段，即接种后0h-48h，26-28℃、通气量6-8l/min培养，此步目的同样在于增大通气量也可起到打破菌丝体的作用，增加生长点，增加菌丝体含量，随后再培养于28℃-30℃、通气量2-4l/min培养五天，待发酵液澄清即可放出罐中发酵物。
6.具体实施案例实施案例1利用吉林农业大学发酵实验室中100l气升式发酵罐培养灵芝菌丝体，培养基配方如下：粉丝下脚料25份、木耳菌糠25份、豆粕粉20份、麦麸粉10份、葡萄糖19份、消泡剂1份。发酵条件为：0h-48h时，温度设置为26℃、通气量为6.2l/min；48h-120h时，温度设置为28℃、通气量为2.3l/min。此条件下连续发酵三次，灵芝菌丝体含量分别为10.32g/l、9.82g/l、11.97g/l。
7.实施案例2利用吉林农业大学发酵实验室中150l气升式发酵罐培养灵芝菌丝体，培养基配方如下：粉丝下脚料20份、木耳菌糠30份、豆粕粉25份、麦麸粉13份、葡萄糖16份、消泡剂1份。
发酵条件为：0h-48h时，设置温度为27℃、通气量为7l/min；48h-120h时，设置温度为29℃、通气量为3l/min。此条件下连续发酵三次，灵芝菌丝体含量分别为11.73g/l、10.31g/l、10.65g/l。
8.实施案例3利用吉林农业大学发酵实验室中50l气升式发酵罐培养灵芝菌丝体，培养基配方如下：粉丝下脚料23份、木耳菌糠27份、豆粕粉22份、麦麸粉14份、葡萄糖13份、消泡剂1份。发酵条件为：0h-48h，温度设置28℃、通气量为8l/min；48h-120h，设置温度30℃、通气量为4l/min。此条件下连续发酵三次，灵芝菌丝体含量分别为9.73g/l、10.52g/l、9.34g/l。
技术特征：
1.一种气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法，具体步骤如下:首先制备液体种子液，即无菌环境下挑取长满平板的灵芝菌丝体两块，每块大小1cm
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1cm，接种于500ml摇瓶，于28℃-30℃、155rpm培养5-6d；于无菌环境下使用咖啡搅拌器打碎菌丝体，增加生长点，打碎后静置3h即得；随后进行气升式发酵罐的培养，即接菌时，接菌口需缠绕一圈浸泡过无水乙醇的脱脂棉，点燃，快速打开接菌口，取液体种子液（10瓶）快速倒入发酵罐中，快速盖紧接菌口接种后0h-48h，26℃-28℃、通气量6l-8l/min培养；48h-120h，于28℃-30℃、通气量2l-4l/min培养,发酵液澄清时即为发酵终点。2.一种适用于气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的培养基，其特征在于，按质量分数计算应包括粉丝下脚料18-27份、木耳菌糠22-30份、豆粕粉17-25份、麦麸粉10-15份、葡萄糖13-20份、消泡剂1份。3.根据权利要求2所述粉丝下脚料、木耳菌糠，应充分干燥，粉碎，过50目筛使用。4.权利要求2中所述培养基，其添加量应为每100l水添加500g。
技术总结
本发明公开了一种气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法及其培养基。气升式发酵罐培养灵芝菌丝体的方法为接种后0h-48h,于26℃-28℃、通气量6L-8L/min培养；48h-120h，于28℃-30℃、通气量2L-4L/min培养,发酵液澄清时即为发酵终点。其培养基配方为粉丝下脚料18-27份、木耳菌糠22-30份、豆粕粉17-25份、麦麸粉10-15份、葡萄糖13-20份、消泡剂1份。本发明能够提高生产效率、降低生产成本、使生产生活废料变废为宝，有助于灵芝液体发酵的工厂化的推广应用。有助于灵芝液体发酵的工厂化的推广应用。
