三氯乙酸

三氯乙酸（TCA）沉淀蛋白的原理之蔡仲巾千创作

TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:

①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.②作为蛋白质变性剂

使蛋白质构象发生改变,流露出较多的疏水性基团,使之聚集沉

淀.③随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,

TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加

热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间

的延长这一作用愈加明显.④电泳图谱显示,BSA,HSA单体谱

带有较明显的展宽现象,这可能是由于TCA的结合,使SDS与蛋

白质的结合量发生偏差,从而造成蛋白质所带电荷的不均一性,

造成迁移率的纷歧致.我们认为在电泳时使用TCA对蛋白质样品的

浓缩或除盐时,对于分子质量大的蛋白质,要慎重选择TCA.对小

分子量蛋白质的浓缩,采取TCA时也有两点需要注意:一是用

TCA沉淀后,尽量用丙酮完全抽提TCA;二是样品处理后要尽快进

行电泳分析,以免发生聚集及断裂,造成结果分析的禁绝确.