
.
生鲜牛奶检验标准
1.0鲜奶的感官理化指标
1.1感官指标
正常生鲜牛奶为乳白色或略带微黄色的均匀胶体,无粘稠、浓厚、分层现象;不得有肉眼可
见的机械杂质;具备乳的正常滋气味,不得有苦、咸、涩、臭等异味。
2.0鲜奶的理化指标
标准可接受不可接受
脂肪含量%3.2≥3.1<3.1
蛋白质含量%3.0≥2.正省级 95<2.95
密度(20/4)1.0301.028-1.032<1.028或>1.032
滴定酸度oT1614-18<14或>18
杂质度ppm≤4>4
汞ppm≤0.01>0.01
农药残留≤0.1>0.1
酒精试验通过80%通过75%未通过75%
冰点-0.54--0.59刑事判决书 <-0.59或>-0.54
抗生素ug/ml
-青霉素≤0.004>0.004
-其它未检出检出
体细胞≤50万/ml>50万/ml
3.0鲜奶的微生物指标
标准可接受不可接受
.
菌落总数≤50万50万-200万>200万
芽孢总数≤100100-1000>1000
耐热芽孢总数≤1010-100>100
嗜冷菌≤100100-1000>1000
4.0常规检验方法
4.1相对密度的测定
4.1.1仪器:乳稠计:20℃/4℃或15℃/15℃;玻璃圆桶:200~250ml
4.1.2测定方法步骤:将10~25℃的牛乳样品小心的注入容积为250ml的量桶中,加至量
桶容积的3/4,不要产生泡沫。用手拿住乳稠计上部小心的将它沉入到相当标尺刻度30处,
放手让它在乳中自由浮动,但不能接触筒壁。待静止1~2min后。读取乳稠计刻度,以牛
乳表面层与乳稠计的接触点(即新月形表面的顶点)为准。根据牛乳温度和乳稠计读数,查
牛乳温度换算表,将乳稠计读数换算成20℃或15℃时的读数。相对密度D20
4
与乳稠计读
数的关系如式所示:
乳稠计读数=(D20
4
-1..000)1000
4.1.3牛乳温度与相对密度换算表
乳稠
计读
数
牛乳温度℃
12223
换算成20℃时牛乳乳稠计读数
2523.
3
23.
5
23.
6
23.
7
23.
9
24.
0
24.
2
24.
4
24.
6
24.
8
25.
0
25.
2
25.
4
25.
6
25.523.
7
23.
9
24.
0
24.
2
24.
4
24.
5
24.
7
24.
9
25.
1
25.
3
25.
5
25.
7
25.
9
26.
1
.
2624.
2
24.
4
24.
5
24.
7
24.
9
25.
0
25.
2
25.
4
25.
6
25.
8
26.
0
26.
2
26.
4
26.
6
26.524.
6
24.
8
24.
9
25.
1
25.
3
25.
4
25.
6
25.
8
26.
0
26.
3
26.
5
26.
7
26.
9
27.
1
2725.
1
25.
3
25.
5
25.
6
25.
7
25.
9
26.
1
26.
3
26.
5
26.
8
27.
0
27.
2
27.
5
27.
7
27.525.
5
25.
7
25.
8
26.
1
26.
1
26.
3
26.
6
26.
8
27.
0
27.
3
27.
5
27.
7
28.
0
28.
2
2826.
0
26.
1
26.
3
26.
5
26.
6
26.
8
27.
0
27.
3
27.
5
27.
8
28.
0
28.
2
28.
5
28.
7
28.526.
4
26.
6
26.
8
27.
0
27.
1
27.
3
27.
5
27.
8
28.
0
28.
3
28.
5
28.
7
29.
0
29.
2
2926.
9
27.
1
27.
3
27.
5
27.
6
27.
8
28.
0
28.
3
28.
5
28.
8
29.
0
29.
2
29.
5
29.
7
29.527.
4
27.
6
27.
8
28.
0
28.
1
28.
3
28.
5
28.
8
29.
0
29.
3
29.
5
29.
7
30.
0
30.
2
3027.
9
28.
1
28.
3
28.
5
28.
6
28.
8
29.
0
29.
3
29.
5
29.
8
30.
0
30.
2
30.
5
30.
7
30.528.
3
28.
5
28.
7
28.
9
29.
1
29.
3
29.
5
29.
8
30.
0
30.
3
30.
5
30.
7
31.
0
31.
2
3128.
8
29.
0
29.
2
29.
4
29.
6
29.
8
30.
1
30.
3
30.
5
30.
8
31.
0
31.
2
31.
5
31.
7
.
31.529.
3
29.
5
29.
7
29.
9
30.
1
30.
2
30.
5
30.
7
31.
0
31.
3
31.
5
31.
7
32.
0
32.
2
3229.
8
30.
0
30.
2
30.
4
30.
6
30.
7
31.
0
31.
2
31.
5
31.
8
32.
0
32.
3
32.
5
32.
3
4.2脂肪的测定
4.2.1试剂:异戊醇、浓硫酸
4.2.2仪器:盖勃氏离心机、乳脂计、11ml移液管
4.2.3操作方法:在乳脂计中加入浓硫酸10ml,沿壁小心加入新鲜牛乳11ml,不要使其混合,
然后加入异戊醇1ml,塞上橡胶塞,用力摇动(瓶口向下向外,避免冲出腐蚀衣服和皮肤)
使其成为均匀棕色液体,静止数分钟(瓶口向下),置于65-70℃水浴中5min取出,以1200
r/min的转速离心10min,取出后(瓶口仍向下)再置于65-70℃水浴中5min。应注意
水浴中的水面必须高于乳脂计的脂肪层。最后按照刻度读出脂肪的百分比。
4.3蛋白质的测定(凯氏定氮法)
4.3.1、原理:
4.3.2、仪器:凯氏定氮仪、移液管、250ml三角烧瓶、电炉、凯氏定氮瓶、100ml容量瓶
4.3.3、试剂:硫酸铜、硫酸钾、硫酸、过氧化氢溶液、40%氢氧化钠、2%硼酸、0.05N硫
酸、蒸馏水、混合指示剂(0.1%的甲基红和0.1%的溴甲酚绿以1:5的比例混合)
4.3.4、消化:用移液管吸取10ml液体样品,移入干燥的500ml定氮瓶中,加入3g硫酸
钾和0.2g硫酸铜混合催化剂及20ml硫酸使样品全部浸泡在消化液中,防止样品粘附瓶颈
上部,摇匀后将瓶以45角斜支在电炉上,微火加热,小心瓶内泡沫冲出影响结果。当样品
炭化变黑产生泡沫时要减小火力,勿使黑色物质上升到凯氏定氮瓶颈部,当泡沫完全停止、
消化液均匀沸腾后,加大火力,直至瓶内容物的颜色逐渐成透明的淡绿色后继续消化
.
0.5-1hr,若凯氏烧瓶壁上粘有炭化粒时应进行摇动,或待瓶内容物冷却数分钟后,用少量、
多次过氧化氢溶液冲下,继续消化0.5hr直至完全透明为止,稍冷,沿瓶壁吹入少许水,混
合,再沿瓶壁吹入少许水(防止剧烈沸腾,水冲出烧瓶),至烧瓶内溶液体积达到约60ml,
将其定量转移入100ml容量瓶中,冷却,定容,混匀备用,同时作空白试验(除不加样品
外其余与消化步骤一致)。
4.3.5、蒸馏:检查定氮装置各连接部分不漏气,在水蒸汽发生瓶内装水约2/3,加数粒玻
璃珠以防爆沸,加热煮沸定氮蒸汽发生瓶内的水,接通冷凝水。吸取20ml消化液于定氮蒸
气蒸馏瓶中,用洗瓶冲洗管壁,将塞用水封好,在冷凝器的下端出液管口处放置一个盛有
50ml硼酸、2滴混合指示剂的250ml锥形瓶,使冷凝器下端的出液管口正好在液面下,一
切准备好后将约20ml40%氢氧化钠慢慢加入蒸馏瓶,一切准备好后,通入蒸气进行蒸馏,
蒸馏至锥形瓶内液体变成蓝色,继续蒸馏10min后用蒸馏水冲洗出液管口,将洗液一并收
集于锥形瓶内,再蒸馏1min,蒸馏途中不得停火断气,否则发生倒吸(若意外情况发生倒
吸时,应及时破除真空)。
4.3.6、滴定:使用微量滴定管以0.05N的盐酸溶液滴定锥形瓶中的溶液,使之由蓝绿色滴
定至紫色为止,同时做空白试验。
4.3.7、计算:X=[(V-V
0
)M0.014/(m25/100)]F100
X——样品中蛋白质的含量
V——滴定时样品消耗盐酸标准溶液的体积ml
V
0
——滴定时试剂空白消耗盐酸标准溶液体积ml
M——盐酸标准溶液的当量浓度
F——氮换算为蛋白质的系数牛乳:6.38
m——样品体积ml
.
4.3.8、清洗:蒸馏前,要将蒸馏装置清洗至少2次,实验完毕后也要清洗2次。
4.4酸度的测定
4.4.1、试剂:0.1mol/L氢氧化钠标准溶液、0.5%酚酞指示剂
4.4.2、仪器:100ml三角瓶,10ml吸管,吸耳球,碱式滴定管
4.4.3、方法及步骤
准确吸取10ml鲜乳注入100ml三角瓶中,用20ml中性蒸馏水稀释。再加入0.5%酚
酞指示剂0.5ml。小心混均后用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定,时时摇动,直至微红色
在30秒内不消失为止。
4.4.4、计算:牛乳滴定酸度(T)=(V1-V0)C10
式中:V1:耗用碱的体积,ml
V0:空白试验耗用碱的体积,ml
C:碱液的浓度,mol/L
4.5干物质的测定
4.5.1减量法
4.5.1.1仪器和试剂:带盖玻璃皿:直径50~70mm;海砂;电热恒温干燥箱;分析天平
4.5.1.2操作方法
4.5.1.3在带盖玻璃皿中加入海砂10~20g,在98~100℃干燥箱中干燥至恒重,称取带盖
玻璃皿及海砂的总重量,计作:m
3
4.5.1.4吸取5ml样品于上述恒重的玻璃皿中,称取其总重量,计作:m
1
4.5.1.5先将加有样品的玻璃皿置于水浴上蒸干,擦去皿壁上的水迹,将其及皿盖同时放入
98~100℃干燥箱中开盖干燥2h,加盖取出,置于干燥器中,冷却20~30min,将盖盖紧
称重记录数值,再将其及皿盖同时放入98~100℃干燥箱中开盖干燥2h,加盖取出,置于
.
干燥器中,冷却20~30min,将盖盖紧称重记录数值,如此反复至前后两次质量差不超过
2mg为止。记录最终结果,计作计作:m
2
4.5.1.6计算
W=(m
2
-m
3
)/(m
1
-m
3
)100%
式中:w——样品中干物质的质量分数;
m
1
——含有海砂的玻璃皿及样品的质量,g;
m
2
——含有海砂的玻璃皿及样品干燥后的质量,g;
m
3
——含有海砂的皿的质量,g。
4.5.2计算法
4.5.2.1测定该奶样的乳稠读(15℃/15℃),记作L;
4.5.2.2测定该奶样的脂肪的质量分数,记作w
4.5.2.3计算
全脂乳固体质量分数=0.25L+1.2w+0.14
4.5.2.4注:如果采用20℃/4℃乳稠计时,应将测得的读数加上2,然后按照上式计算。
4.6非脂乳固体的测定
可由所测得的总固体质量分数和测得的脂肪质量分数计算得到,
非脂乳固体=总固体-脂肪
4.7美兰试验
4.7.1、试剂:亚甲兰溶液:吸取5ml饱和亚甲兰乙醇溶液,加入195ml水混匀,备用。
4.7.2、仪器:水浴锅
4.7.3、操作方法:吸取20ml牛乳,置于试管中。在水浴锅上加热至38~40℃,加入1ml
亚甲兰溶液,混匀后,将试管置于38~40℃恒温水浴锅中,经过20min,2h和5.5h观察
.
退色情况。
4.7.4、根据退色时间将牛乳分为四个等级。
4.8体细胞检测
4.8.1尿素试验法
4.8.1.1试剂:十二烷基磺酸钠4g、尿素24g用适量水溶解,再定容至100ml,然后用
0.05mol/L稀硫酸溶液调节PH至8.0。
4.8.1.2操作方法:取等量的试剂与奶样混合,摇匀即可观察。
4.8.1.3结果评定:
无混浊-
混浊+50万体细胞/ml
粘稠++100万体细胞/ml
很粘稠+++150~200万体细胞/ml
4.8.2细胞计数板计数法
5.0特殊奶检验
5.1、乳房炎乳的检查
级别乳的质量退色时间
每ml牛乳相当
于细菌数
1合格大于5.5h小于50万
2合格2.5-5.5h50-400万
3不好20min-2h400-2000万
4很差小于20min大于2000万
.
乳房炎分为慢性(隐形)乳房炎和急性(临床)乳房炎。传染源:隐形主要为金黄色葡萄球
菌、溶血性链球菌等传染性细菌;临床型主要为大肠杆菌、芽孢杆菌、放线菌等环境性病菌。
传播途径:隐形为从牛到牛,临床型为从环境到牛。病菌直接从乳头进入乳房。乳房炎乳中
体细胞数、过氧化氢酶(多由体细胞崩坏而得)、氯化钠、乳清蛋白、PH等均增高,酸度、
脂肪、乳糖、非脂乳固体等均减少。乳房炎乳可能因含有血液及凝固物,外观显粉红色。因
离子浓度平衡打乱,酒精试验呈阳性反应,因含有不被理解 过多的过氧化氢酶,自身具有很强的还原
体系,故对甲烯兰和刃天青试验敏感。因含有较多的氯离子,氯糖比大于4.0,故对硝酸银
试验敏感,呈黄色。因含有较多的体细胞,故对尿素呈阳性反应,故对下列检测项目的综合
考虑可以正确判断:感官检验{蛋白不稳定,滋气味差}、滴定酸度{降低}、酒精试验{阳
性}、尿素试验{阳性}、硝酸银试验{阳性}、甲烯兰或刃天青试验{敏感}
5.1.1、试剂配制:
Na
2
CO
3
溶液:60gNa
2
CO
3
.10H
2
O溶于100ml水中。
CaCL
2
溶液:40g无水氯化钙溶于300ml水中。
g
以上两种溶液加温过滤,然后混在一起。加入等量的15%NaOH溶液,搅均匀后过滤,
加入少量溴甲酚紫(有助于观察结果)。
5.1.2、检验方法:吸取乳样3ml,置于白色平皿中,加入0.5ml上述试剂,混匀,10秒
钟后观察结果。
5.1.3结果判断
无沉淀及絮片(-)阴性;
稍有沉淀发生(+-)可疑;
肯定有沉淀(+)阳性;
发生粘稠性团块并继之分为薄片(++)强阳性;
.
有持续性的粘稠团块(凝胶)(+++)强阳性。
5.2陈旧奶的检验,原奶新鲜度检验
5.2.1煮沸试验
5.2.1.1检验方法:鲜奶5ml,加热煮沸1分钟,加等量中性水,观察凝固状态判定乳的酸
度。
5.2.1.2结果判定:
凝固状态酸度
有少量絮块酸度约为27oT
有较多凝块酸度约为28oT
全部为凝块酸度约为30oT
酸度在25~26oT即出现凝块,判定为不新鲜乳。
5.2.2酒精试验
5.2.2.1原理:本试验系乙醇的脱水作用,改变了酪蛋白的稳定性,陈旧乳即出现凝固现象,
但因牛的生理失调,先天性酪蛋白失常亦可出现低酸度酒精凝固乳。
5.2.2.2检验方法:牛乳与75的乙醇等量混合(一般2ml),5秒钟内观察结果。本试双十一标题 验不
适于检验羊奶,因羊奶蛋白质结构与牛奶不同,钙含量亦高于牛奶,因此在酸度牛奶检验正
常时,羊奶则产生凝固。
5.2.2.3结果判定:
反应现象程度表示方法酸度
不凝新鲜-20oT
极细凝固物不太新鲜21~22oT
细凝固物不新鲜+22~24oT
.
中型凝固物不新鲜++24~26oT
大型凝固物不新鲜+++26~28oT
极大型凝固物很不新鲜++++28~30oT
5.2.3过氧化酶测定法
5.2.3.1操作方法:取牛乳4滴于凹玻片上,加过氧化氢2滴,待1~2分钟,观察有无气
泡产生。新鲜乳2分钟不产生气泡。
5.2.3.2结果判定:
稍微不新鲜乳,1~2分钟产生气泡。
中等不新鲜乳,30~60秒开始产生气泡,面积中等。
极不新鲜乳,20~30秒开始产生气泡。布满全面积。
5.3生牛乳与熟牛乳的鉴别检验
5.3.1原理:生牛乳中有过氧化氢酶,能分解过氧化氢而与色素作用,牛乳加热后过氧化氢
酶即被破坏。
5.3.2检测步骤:取5mL待测牛乳放入实干中,加入0.2mL1%过氧化氢,摇匀,再加入
0.2mL2%的对苯二胺,摇匀。
5.3.3结果判定:生牛乳或加热至78℃以下者呈青蓝色,加热至79~80℃者,30s后呈淡
灰青色,加热至80℃以上者无颜色出现。
5.4硝酸盐的检出
5.4.1原理:在柠檬酸的酸性溶液中,NO
3
-能被Zn还原为NO
2
-,NO
2
-与对氨基苯磺酸
及盐酸奈乙二胺作用,能生成红色的偶氮化合物。
5.4.2试剂:锌粉(Zn)0.6g
硫酸钡(BaSO
4
)100g(110℃烘干1h)
.
柠檬酸(C
6
H
8
C
7
H
2
O)75g
硫酸锰(MnSO
4
H
2
O)10g
无水对氨基苯磺酸(C
6
H
4
(NH
2
)(SO
3
H))4g
盐酸萘乙二胺(C
10
H
7
NHCH
2
CH
2
NH
2
2HCl)2g
研细后将0.6g锌粉与100g硫酸钡充分混合,再与上述试剂全部混合制成固体试剂,密封
保持干燥存放于棕色瓶中。
5.4.3仪器:试管,吸管。
5.4.4操作:取生鲜牛乳2mL于试管中,加上述固体试剂0.3g,振荡1.5min。
5.4.5结果判定:若试管中呈红色,说明生鲜牛乳中NO
3
-的含量超过正常值。
5.5亚硝酸盐的检出
5.5.1原理:酒石酸溶液中,NO
2
-能与对氨基苯磺酸重氮化再与—萘胺偶合成偶氮化合物。
5.5.2试剂:酒石酸(C
4
H
8
O
6
)89g
无水对氨基苯磺酸(C
6
H
4
(NH
2
)(SO
3
H))10g
—萘胺1g
将上述三种试剂分别称好后小心在研钵中研细,充分混合,密封保持干燥存放于棕色瓶中,
该固体试剂称为格里斯千试剂。
5.5.3仪器:试管,吸管。
5.5.4操作:取生鲜牛乳3mL于试管中,加上述固体试剂0.3g,振荡(微加热)。
5.5.5结果判定:若试管中呈桃红色,说明该生鲜牛乳中NO
2
-的含量超过正常值。
5.6乳中血与脓的鉴别
5.6.1试剂:取少量的二胺基联苯,溶解在盛有2mL95%酒精的试管内,加入2mL3%的
过氧化氢溶液,摇匀后再加入3~4滴冰醋酸。
.
5.6.2检验方法:在上述配制的试液中,加入4~5mL待测牛乳。
5.6.3结果判定:如有血与脓存在时,20~30s后液体呈现深蓝色。
6.0掺假检验
6.1掺水的检验
6.1.1、乳清比重测定法
6.1.1.1原理:正常牛乳中,乳糖及矿物质含量比较稳定,因此可以用乳清比重来确定牛乳
可能掺水、米汤、豆浆、豆饼水和稀薄动物胶等。
6.1.1.2器材:5ml吸管、250ml烧杯4~5个、500ml玻璃漏斗、水浴锅或恒温箱、乳比
重计、定性滤纸、200ml三角杯。
6.1.1.3试剂:20%醋酸(取冰醋酸20ml,加100ml蒸馏水)
6.1.1.4方法:取乳样200ml于250ml烧杯中,加入20%醋酸4ml,于40℃水浴下放置,
使蛋白质凝固后过滤,最后转入量桶,按牛乳比重测定方法测定。
结果判定:正常牛乳乳清比重为1.027~1.030,如果低于1.027,至少掺5%的水或相应
的液体。
6.1.2相对密度法
6.1.2.1原理:正常牛乳在20℃时,相对密度在1.029~1.033之间,掺水后的牛乳,其相
对密度将低于此值,(每加10%的水可使比重降低0.003)。
6.1.2.2方法:将混合均匀的待测样品小心的倒入200ml或250ml量筒中,不要产生气泡,
然后小心的放入比重计,注意不可使比重计的重锤与筒壁相碰撞。静置2~3分钟,读取相
对密度值即可。
6.1.2.3脱脂牛乳的相对密度会升高,可采用乳清相对密度法测定
6.2掺碱的检验
.
6.2.1目的:为掩盖牛乳的酸败现象,降低牛乳的酸度,防止牛乳因酸败而发生凝结,可能
向已酸败的牛乳中加入碳酸钠(苏打)或碳酸氢钠书的草书 (小苏打)。加碱后的牛乳不仅滋味不佳,
而且细菌易于生长繁殖,对人体健康有害。因此,检验牛乳中掺碱是很重要的。
6.2.2检验方法
6.2.2.1生鲜牛乳中如掺有碱性物质,可使指示剂溴麝香草酚蓝变蓝色。溴麝香草酚蓝(亦
称为溴百里香酚蓝)是一种酸碱指示剂,PH值变化范围在6.0~7.6。颜色由黄变蓝,加碱
的生鲜牛乳氢离子浓度发生了变化,因而使溴麝香草酚蓝显示出与正常牛乳不同的颜色,同
时根据颜色的不同,还可判断其加碱量的多少。
6.2.2.1.1试剂:0.04%溴麝香草酚蓝[C
27
H
28
O
5
Br
2
S]乙醇(95%)溶液:称取0.04g
溴麝香草酚蓝溶于少量95%乙醇溶液,然后将溶液转移到100mL容量瓶中,再用95%乙
醇溶液稀释至刻度。
6.2.2.1.2仪器:试管、吸管、洗瓶(内装蒸馏水)。
6.2.2.1.3操作:先用洗瓶冲洗试管,然后取生鲜牛乳样5mL于试管中,将试管保持倾斜位
置,沿管壁小心向试管中加入0.04%溴麝香草酚蓝乙醇溶液5滴,而后将试管轻轻斜转2
—3回,使其更好地相互接触,但且勿使阴天相混合,然后把试管垂直放置,2min后根据
环层指示剂的颜色特征判定检验结果。同时用未掺碱的正常生鲜牛乳作空白对照。
6.2.2.1.4掺碱量的判定:根据环层颜色的变化判定结果如下表,对照试管中指示剂无颜色
变化,生鲜牛乳中含碱量折算成NaHCO
3
的量。见下表:
生鲜牛乳中含
NaHCO
3
的浓度
单位
环层颜色
特征
生鲜牛乳中含
NaHCO
3
的浓度
单位
环层颜色
特征
无%黄0.5%青绿
0.03%黄绿0.7%淡青
.
0.05%淡绿1.0%青
0.1%绿1.5%深青
0.3%深绿
6.2.2.1.5注:掺水的生牛乳、掺石灰水、洗衣粉以及乳房炎牛乳均可呈现出黄绿色至深青
色的颜色变化。
6.2.2.2现场检验可用玫瑰红法。
6.2.2.2.1操作方法:取待检样品5mL,置于试管中,加入5mL0.5g/L玫瑰红乙醇溶液,
混匀,观察颜色。
6.2.2.2.2结果判定:未加碱者呈黄色,加碱呈红色,并且红色深浅与加碱量成正比。
6.3牛乳中掺豆浆或豆饼水的鉴别
6.3.1皂素检测法
6.3.1.1原理:豆浆中含有皂素,皂素可溶于热水或热酒精,并可与氢氧化钠反应生成黄色
化合物。
6.3.1.2操作步骤:取样品20ml,放入三角瓶中,加入(1:1)乙醇-乙醚混合液3ml及
25%氢氧化钠溶液5ml,摇匀静置5min后观察。
6.3.1.3结果判定:混合液成黄色,说明样品中掺有豆浆,如呈暗白色则为正常。
6.3.1.4采用上述方法,需同时作空白对照试验。本方法灵敏度不高,当豆浆掺入量大于10%
才呈阳性反应。
6.3.2铁含量测定法
6.3.2.1原理:正常的生鲜牛乳中含铁量<2mg/kg,而大豆中含铁量>100mg/kg,若生鲜
牛乳中掺有豆浆或豆饼水,则乳中含铁量显著增加,所以可以用铁定性法间接测出乳中是否
含有豆浆或豆饼水,Fe3+能被氢氧化亚锡还原为Fe2+,Fe2+与邻二氮菲在PH2~9的溶液
.
中,能反应生成水溶性的橙红色络合物〔(C
12
H
8
N
2
)
3
Fe〕2+。
6.3.2.2仪器:18200mm大试管,吸管5ml、10ml
6.3.2.3试剂:氯化亚锡(SnCl
2
2H
2
O)、邻二氮菲(C
12
H
8
N
2
)溶液{取1.0g邻二氮菲溶
于100ml乙醇中,加水稀释至100ml。
6.3.2.4操作:取生鲜牛乳10ml于大试管中,加入100mg的SnCl
2
2H
2
O,充分振摇,加
2ml邻二氮菲溶液,混匀观察。
6.3.2.5结果判定:掺豆浆或豆饼水的牛乳呈粉红色颜色随掺入量的增加而加深。正常生鲜
牛乳试管中无明显的颜色变化。该法检出限为5%。
6.3.3感官检验法:
6.3.3.1操作方法:取一玻璃杯牛奶,用棒搅匀,静置片刻,然后倒入另一杯子内。如果原
来的玻璃杯底部有沉淀物和细渣出现,可视为有豆浆和淀粉掺入。另外,牛奶中掺入豆浆时,
还可以嗅到豆腥味。
6.4牛乳中掺淀粉或米汤类的鉴别
6.4.1目的:为了提高牛乳的稠度和非脂固体的含量,往往向牛乳中掺入淀粉或糊精,或直
接加入米汤、面粉等淀粉类物质。
6.4.2方法:取被检乳样5ml于试管中,稍稍煮沸,加入数滴碘液(用蒸馏水溶解碘化钾
4g,碘2g,移入100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度)。
6.4.3结果判定:如有上述物质加入,则出现蓝色或蓝青色反应,并出现沉淀物。含糊精则
呈现紫红色。正常牛乳无显色反应。
6.5淀粉酶的检出
6.5.1原理:利用碘与淀粉变蓝的特效反应,检验牛乳中是否存在淀粉酶。
6.5.2试剂:①2%碘溶液:取4gKI溶于少量蒸馏水中,然后用此溶液溶解结晶碘2g,
.
待结晶碘完全溶解后转入100mL容量瓶中,加水至刻度。
②2%可溶性淀粉溶液:取2g可溶性淀粉,先用少量水搅成糊状,再用沸水溶
解,冷却后转移至100mL容量瓶中,加水至刻度。
6.5.3仪器:试管、吸管。
6.5.4操作:取生鲜牛乳5mL于试管中,加入2滴2%可溶性淀粉液,加热至75℃,保温
5min,然后冷却至室温后再加入2滴2%碘液。
6.5.5结果判定:如有淀粉酶存在不显蓝色,正常乳呈浅蓝——深蓝色。
6.6乳中掺尿(人尿、牛尿等哺乳动物尿)
6.6.1目的:利用方便条件掺假提高蛋白质含量。
6.6.2原理:掺尿原奶中的(来自哺乳动物的尿)肌酐在PH12的条件下与碱性苦味酸作用
生成红色的苦味酸肌酐复合物。且在此条件下,苦味酸与肌酐的反应最为完全而且假肌酐的
干扰最小。
6.6.3试剂配制:饱和苦味酸溶液:称取苦味酸3g,加蒸馏水200ml。
6.6.4操作方法:取原奶2~5ml,加10%氢氧化钠4滴,混匀,加饱和苦味酸0.5~1ml,
放置3~5分钟。
6.6.5结果判定:正常原奶呈黄色:掺尿奶呈红色。掺尿量越大,红色出现越快,且颜色越
深。最低检出量>2%,但以>3%的掺尿检出为明显。
6.7牛乳中掺尿素的检验
6.7.1二乙酰一肟测定尿素法
6.7.1.1目的:掺尿素是为了在掺水的同时加入以提高牛乳的相对密度,增加牛乳中非脂固
体的含量,又提高使用凯氏定氮法所得到的蛋白质的含量。
6.7.1.2原理:尿素与二乙酰一肟在酸性条件下,经锰离子(或三价铁离子)的催化产生缩
.
合,并在氨基硫脲存在下,形成5,6-二甲基-1,2,4三嗉的红色复合物。
6.7.1.3试剂配制:
6.7.1.3.1酸性试剂:在1000ml容量瓶中加入约100ml蒸馏水,然后加入浓硫酸44ml及
85%磷酸66ml,冷却至室温后,加入硫酸脲80mg、硫酸锰2g,溶解后用蒸馏水稀释至
1000ml。置棕色瓶中放入冰箱内可保存半年。
6.7.1.3.22%二乙酰一肟试剂:称取二乙酰一肟2g,溶于100ml蒸馏水中。置棕色瓶中放
置冰箱中可保存半年。
6.7.1.3.3使用液:取酸性试剂90ml和2%二乙酰一肟试剂10ml混合均匀,即可食用。
6.7.1.4操作方法:取使用液1~2ml于试管中,加原奶1滴,加热煮沸约1min,观察结果。
6.7.1.5结果判断:正常原奶无色或微红色;掺入尿素或尿的原奶立即呈现深红色,掺入量
越大,显色越快,红色越深。最低检出量为50mg/100ml。
6.7.1.6注意事项:由于正常原奶中存在一定量的尿素氮,含量约为8~35mg/100ml,因
此正常原奶煮沸时间超过2分钟也可出现淡红色。
6.7.2亚硝酸钠测定尿素法
6.7.2.1原理:尿素能与亚硝酸钠在酸性溶液中反应生成二氧化碳、氮气,生鲜牛乳中若掺
有尿素,引入亚硝酸钠后就会发生反应,若无尿素存在,那么引入的NO
2
-就遗留在生鲜牛
乳中,可通过检验引入的NO
2
-是否存在,判断鲜乳中有无尿素存在。
6.7.2.2试剂:1)格里斯千试剂:称取89g酒石酸,10g无水对氨基苯磺酸及1g-萘胺,
小心在研钵中研细,混匀,密封干燥保存在棕色瓶中。2)1%亚硝酸钠溶液:取1g亚硝酸
钠,用少量蒸馏水溶解东北乱炖 ,定容到100ml容量瓶中。3)浓硫酸:d:1.84
6.7.2.3操作:取生鲜牛乳样3ml,加入到试管中,准确加入亚硝酸钠溶液1ml、浓硫酸1ml,
摇匀放置5分钟,待气泡稍落,加入黄豆大的格里斯千试剂(约0.3g~0北京国际露营公园 .5g),混匀观察试
.
管中的颜色变化。
6.7.2.4结果判定:正常牛乳呈紫红色,掺尿素的乳样试管中无颜色变化或略呈黄色。本法
灵敏度为0.01%,要求亚硝酸钠的浓度及加入量都要准确。
6.8牛乳中掺入洗衣粉的检验
6.8.1荧光测定法:
6.8.1.1原理:洗衣粉中含有十二烷基苯磺酸钠,在紫外光下发荧光。
6.8.1.2操作方法:取待测牛乳5~10ml于试管中,在365nm波长紫外分析仪下观察荧光,
同时用天然乳作对照。
6.8.1.3结果判定:掺有洗衣粉的牛乳发出银白色荧光,正常乳为无荧光的黄色。此法的检
出限量为0.1%。
6.8.2次甲基蓝测定洗衣粉法
6.8.2.1原理:洗衣粉中通常含有十二烷基苯磺酸钠和硫酸钠的成分,烷基苯磺酸钠烷基苯
磺酸钠和次甲基蓝能发生反应生成蓝色的化合物,易溶于有机溶剂。选用三氯甲烷提取时,
此蓝色化合物浸入三氯甲烷中,使三氯甲烷层出现蓝色。
6.8.2.2试剂:1)0.1%次甲基蓝{C
16
H
18
N
3
SCl3H
2
O}溶液:取0.25g次甲基蓝溶于100ml
蒸馏水中,加入浓硫酸1.7ml,再加蒸馏水稀释至250ml,配成的溶液贮存于棕色的试剂
瓶中。2)三氯甲烷{CHCl
3
}。
6.8.2.3仪器:试管、吸管
6.8.2.4操作:取生鲜牛乳样1ml于试管中,加0.1%次甲基蓝溶液10滴,混匀,再加三氯
甲烷3~5ml,振摇数秒钟静止,观察上层三氯甲烷层的颜色变化。
6.8.2.5结果判定:
三氯甲烷层呈无色或淡灰色,乳层呈蓝色(未作用的次甲基蓝的颜色),则判断为检验阴性;
.
三氯甲烷层呈淡蓝色,说明洗衣粉掺入量>10mg%;
三氯甲烷层呈天蓝色,检出量碘>30mg%;
三氯甲烷层蓝色,检出量>50mg%;
乳层蓝色很淡或乳层全部褪色,而三氯甲烷层呈深蓝色,检出量为50~100mg%。
6.8.2.6注:该法最低检出限为>10mg%,有机硫酸盐,有机醋酸盐、、硝酸盐、硫氰化物
等可产生干扰反应。
6.9牛乳中掺硫酸铵的鉴别
6.9.1操作方法:向试管中加入1ml牛乳试样,再依次加入0.5ml0.2%氢氧化钠溶液、2%
次氯酸钠溶液和5%苯酚溶液,置试管于沸水浴中加热约20s。
6.9.2结果判定:如果混合液迅速变成蓝色,则说明测定的牛乳中掺有化肥硫酸铵。
6.10牛乳中掺石灰水的检出
6.10.1原理:正常牛乳中含钙量小于1%,如果向牛乳中加入适量的硫酸盐后,再加玫瑰红
酸钠及氯化钡则呈现红色外观。如果是掺有石灰水的牛乳,则生成硫酸钙沉淀,呈现白土样
外观。
6.10.2操作步骤:取待测奶样5ml,加入1%的硫酸钠、1%的玫瑰红酸钠和1%氯化钡溶
液各一滴,摇匀。
6.10.3结果判定:观察颜色变化,天然乳为黄色,掺石灰水者为白土色。
6.10.4注:本法检出灵敏度100ppm。
6.11牛乳中掺入硫酸盐的鉴别(芒硝:Na2S氧化物是什么 O410H2O和石膏:
Ca2SO42H2O)
6.11.1原理:掺入硫酸盐的生鲜牛乳,SO
4
2-的含量较高,可以利用玫瑰红酸钠与BaCl
2
作用,生成红色的玫瑰红酸钡,当,SO
4
2-进入时,,SO
4
2-与Ba2-反应生成较细腻的
.
BaSO
4
沉淀,使玫瑰红酸钡的红色褪去的反应,检出有过量的硫酸盐存在于牛乳中。
6.11.2试剂:1)20%CH
3
COOH溶液:用市售36%的分析纯醋酸稀释而得。
2)1%BaCl
2
溶液:取1gBaCl
2
2H
2
O用少量蒸馏水溶解,稀释到100mL。
3)0.2%玫瑰红酸钠[C
6
Na
2
O
6
]水溶液:取0.2g玫瑰红酸钠溶于少量蒸馏水,稀熙熙攘攘的近义词 释到
100mL。
6.11.3仪器:试管、吸量管。
6.11.4操作:取生鲜牛乳样5mL,加CH
3
COOH2滴,BaCl
2
5滴,玫瑰红酸钠2滴,
充分振荡。
6.11.5结果判定:若试管中呈黄色,则为阳性结果,掺入了芒硝。若呈红色,则为阴性结
果,属于质量正常牛乳。红色褪去的程度与SO
4
2-的含量成正比,红色全部褪去时SO
4
2-
的含量约>0.115%。
6.12牛乳中掺入食盐的鉴别
6.12.1目的:牛乳掺水后相对密度下降,为了增加相对密度,掺假者可能会掺水后又掺盐
来迷惑消费者。我们可根据下述原理来进行检验。
6.12.2原理:CrO
4
2-、Cl-均可与Ag+反应生成难溶性沉淀,但因二者溶度积不同,Ag
2
CrO
4
沉淀遇一定浓度的Cl-而褪色,Ag+与Cl-作用生成AgCl沉淀,褪色程度与Cl-含量成正
比,AgCl白色沉淀因CrO
4
2-的浓存在而呈黄色。
方程式:2Ag++CrO
4
2-=Ag
2
CrO
4
(红褐)
Ag++Cl-=AgCl(白)
6.12.3试剂:①0.009NAgNO
3
溶液:称取1.533gAgNO
3
溶于少量蒸馏水,然后移
入1000mL容量瓶中稀释到刻度,制得溶液保存于棕色瓶中。
②10%K
2
CrO
4
溶液:称取K
2
CrO
4
10g,用少量蒸馏水溶解,然后移入100mL
.
容量瓶中稀释至刻度。
6.12.4仪器:试管、吸管1mL,5mL。
6.12.5操作:吸取AgNO
3
溶液5mL于试管中,滴加K
2
CrO
4
2滴,混匀,试管呈红褐
色,再取生鲜牛乳样1mL于试管中,充分摇匀。
6.12.6结果判定:如红褐色消失变为黄色,说明生鲜牛乳中Cl-含量超过0.16%,折合成
NaCl为0.26%以上,可断定乳中有NaCl掺入,该生鲜牛乳为异常乳。
6.13牛乳中掺蔗糖的鉴别
6.13.1目的:牛乳掺水后相对密度下降,为了增加相对密度,有些掺假者掺水后有掺糖。
6.13.2原理:牛乳中是否掺糖,可利用蔗糖与间苯二酚的蓝色反应来判断,原理是适量的
牛乳酸化后可以和间苯二酚发生明显的蓝色反应。
6.13.3.1间苯二粉测定蔗糖法:
6.13.3.1.1操作步骤:取牛乳15mL于小烧杯中,加0.1g间苯二酚及1mL浓盐酸,在电炉
上加热煮沸,观察颜色变化。
6.13.3.1.2结果判定:有蓝色出现则为正常乳,如果掺有蔗糖则呈红色。
6.13.3.2钼蓝法
6.13.3.2.1操作方法:取牛乳10mL于小烧杯中,加0.5g钼酸铵,混匀,加10mL10%盐
酸溶液,混匀,置于80℃水浴中加热。
6.13.3.2.2结果判定:呈现蓝色则表示掺有蔗糖。
6.13.3.3蒽酮缩合法:
6.13.3.3.1原理:蔗糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛,再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物,
如有还原糖存在时,先用碱使还原糖转向异构化,然后再进行蔗糖的测定。
6.13.3.3.2试剂:0.1%蒽酮溶液:取0.1g蒽酮溶于100mL3:1H
2
SO
4
溶液中,用时现配。
.
6.13.3.3.3仪器:试管、吸量管1mL,5mL。
6.13.3.3.4操作:取生鲜牛乳样1mL于试管中,加蒽酮试剂2mL,振荡观察试管中颜色变
化,6.13.3.3.5结果判定:在5min内变为透明绿色,则说明有蔗糖掺入。该方法的灵敏度
为0.1%。
6.14牛乳中掺入葡萄糖的鉴别
6.14.1原理:葡萄糖具有还原性,在加热的强碱液中能使铜离子Cu2+还原为亚铜离子Cu
+,班氏定性试剂是一种在碱性中含有铜离子柠檬酸钠的复合剂,葡萄糖能使试剂中的Cu2
+还原为Cu+,形成黄色的氢氧化铜或红色的氧化铜。
6.14.2试剂:班氏定性试剂:称取柠檬酸钠(Na
3
C
6
H
5
O
7
2H
2
O)173g,无水碳酸钠
100g或结晶碳酸钠200g,放入2000mL三角瓶内,加蒸馏水约700mL加热,并用玻
璃棒不断搅拌使其溶解,溶解后待冷至室温。另在200mL三角瓶中,称入硫酸铜结晶
(CuSO
4
5H
2
O)17.3g,加蒸馏水约100mL加热溶解,将硫酸铜溶液慢慢倒入前液,倒
时不断搅匀,再用蒸馏水稀释至1000mL,如试剂混浊,可用脱脂棉过滤。
6.14.3检验方法:将班氏液5mL置于大试管中煮沸,随后加被检乳0.5mL,轻摇混合,继
续在火焰上直接煮沸1~2min,冷却后观察颜色变化。
6.14.4结果判断:正常乳:乳呈浅蓝色;
掺葡萄糖乳:如果试管底部有少量绿色沉淀物出现,证明乳中含有葡萄糖。含乳量在0.5%。
如果出现多量红棕色沉淀物,表明乳中含有20%的葡萄糖。
6.15牛乳双掺假的鉴别
6.15.1检验方法:双掺假是指牛乳脱去脂肪后再加水,简称脱脂又加水。牛奶经双掺假后,
其理化指标的改变较大,除了测牛奶的比重以外,还要测定牛奶的脂肪含量。根据测得的结
果,加以综合判断,参见表:
.
比重20/4℃脂肪,%结果判断
1.028~1.032>3.0全乳
1.034~1.037<3.0脱脂乳
1.018~1.029<3.0加水乳
1.028~1.034<2.0脱脂又加水
6.16植脂末、油脂粉的检测
6.16.1目的:厂家以乳脂率论价,奶农为了掺水而又不使乳脂率下降,向原奶中掺植脂末
或油脂粉。
6.16.2原理:植脂末和油脂粉是由棕榈油和糊精或饴糖生产而成,而糊精和饴糖中含有葡
萄糖成分,利用葡萄糖遇尿糖试纸显色的原理来检测。
6.16.3操作方法及判断:取一平板,将10ml奶样注入平板中,倾斜看平板上是否有漂浮物。
由于棕榈油熔点是24℃,一般厂家把收购原奶的温度都控制在低于15℃,而植脂末和油脂
粉遇冷会有少量的棕榈油络合物浮在奶样上。然后取尿糖试纸一根,浸入奶样中2s后取出,
在1s后观察结果。有植脂末或油脂粉时尿糖试纸会有颜色变化。随着添加量的增加,颜色
由淡蓝-〉浅绿色-〉黄绿色-〉黄色。如果尿糖试纸颜色呈棕红色则是添加了葡萄糖粉。
6.17胺盐的检测
6.17.1目的:掺胺盐是为了提高蛋白质的含量。
6.17.2原理:原奶中掺入的胺盐与碘化汞钾在碱性溶液中生成棕黄色络合物,正常原奶中
胺盐含量较低,对显色反应无显著影响。
6.17.3试剂配制:取碘化汞45.5g及碘化钾34.9g,溶于100ml蒸馏水中;取氢氧化钠112g
溶于500ml蒸馏水中,溶解冷却至室温。将上述2中溶液混合并用蒸馏水稀释至1000ml,
放置2~3天待试剂澄清后使用。
.
6.17.4操作方法:取原乳2ml于小试管中,倾斜试管,沿试管壁慢慢加入碱性碘化汞钾试
剂5~10滴形成接触面,放置约1min。
6.17.5结果判断:正常原奶接触面不变色;掺入胺盐的原奶接触面呈乳黄色至深棕色,掺
入量越多显色反应越快,棕色越深。
6.17.6注意事项:试剂配制所用蒸馏水及所用试剂必须无氨;试剂加入后,稍停一会就要
观察结果,放置时间过长,会产生硫化物的棕黑色反应。
6.18水解蛋白粉的检测
6.18.1目的:乳制品企业以蛋白质含量计价,部分奶农为了不使蛋白质含量降低,同时也
能提高非脂干物质的含量而向原奶中加水解蛋白粉。
6.18.2原理:用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉
淀反应。
6.18.3试剂配制:
1)除蛋白试剂:硝酸汞14g,加入100ml蒸馏水,加浓硝酸约2.5ml,加热助溶,待试剂
全部溶解后加蒸馏水至500ml。
2)饱和苦味酸:称取苦味酸3g,加蒸馏水200ml。
6.18.4操作方法:取100ml奶样,在水浴中加热浓缩至60ml,冷却至20℃时取5ml奶样,
加除蛋白试剂5ml混合均匀,过滤,取滤液约1ml,沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约
0.5ml形成环状接触面。
6.18.5结果判断:正常原乳,滤液清亮,加苦味酸试剂后接触面无变化;掺水解蛋白的原
乳,滤液呈半透明状态,略带乳清色,加苦味酸试剂后接触面呈白色环状。掺水解蛋白粉越
多,滤液越不透明,白色沉淀越明显。最低检出量0.1%。
6.18.6结论:水解蛋白粉是用废皮革、毛发等下脚料加工提炼而成,根本不能食用,而且
.
其中的重金属含量以及亚硝酸盐等致病物质含量较高。长期食用含有水解蛋白粉的牛奶及奶
粉,会对人体造成极大的危害。
6.19挥发性氮
6.19.1目的:将掺假原奶及异常奶混入正常奶中。
6.19.2原理:正常原奶中游离氨含量极低,但变质原奶、乳房炎奶及掺铵盐类奶,其氨含
量显著增加,在弱碱性条件下,加热使其氨挥发使指示剂反应显色。
6.19.3试剂配制:
1)2%氧化镁20g溶于100ml蒸馏水中。
2)指示剂:溴麝香草酚兰0.04g溶于95%分析纯乙醇100ml中。
6.19.4操作方法:取原奶2ml,加入2%氧化镁0.5ml混合均匀,管口用浸有指示剂的棉
球堵住,加热煮沸2~3min。
6.19.5结果判定:正常原奶可使浸有指示剂的棉球呈黄色;变质奶、乳房炎奶、掺铵盐奶
呈绿到蓝色。
本文发布于:2023-03-21 00:48:53,感谢您对本站的认可!
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