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更新时间:2023-03-08 12:44:48 阅读: 评论:0

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2023年3月8日发(作者:卸妆水和卸妆油的区别)

微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程

1.概述

致病性大肠埃希菌包括肠产毒型大肠埃希菌、肠致病型大肠

埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌和肠凝

聚型大肠埃希菌5群。与普通大肠埃希菌的生化反应相似,

应结合血清反应(O、H和K抗原)、毒性试验(ST和LT

肠毒素)和临床症状,分别鉴定5型致病性大肠埃希菌。

2.标本类型

粪便标本。

3.鉴定

3.1形态染色与一般大肠埃希菌相同。

3.2培养特性在麦康凯琼脂平板上形成不透明、粉红色或

无色菌落。

3.3生化反应与普通大肠埃希菌相似。

3.4鉴别要点在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落。

IMViC++--,

3.5不发酵或迟发酵山梨醇,为本菌的主要特征。

3.6操作步骤

3.6.1氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。

3.6.2致病型大肠埃希菌的鉴定

肠致病型大肠埃希菌(EPEC)婴幼儿水样或蛋花汤样分

型。O:H分型血清作EPEC便,鉴定为大肠埃希菌后用.

肠产毒型大肠埃希菌(ETEC)水样便,鉴定为大肠埃希

菌后需要测定ST和LT两种肠毒素及血清分型。ST的检查

可用兔肠段结扎试验,免疫学或分子生物学方法(DNA探针)

检测。

肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)细菌性痢疾样便,生化特性

与志贺菌相似,不发酵或迟发酵乳糖,赖氨酸脱羧酶阴性,

无动力,符合EIECO:H血清分型,豚鼠眼结膜试验、HELA

细胞侵入试验阳性。

肠出血型大肠埃希菌(EHEC)早期为水样便后为血便,有

50多个血清型,最具代表性的是O157:H7不发酵或迟发酵

山梨醇,在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落,可用

EHECO:H诊断血清进行分型。

4.药敏

参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI

M100-S20最新版本文件。

5.质量控制

参见质量管理程序。

6.检验结果解释与分析

疑似致病性大肠埃希菌感染,分离菌应先鉴定为大肠埃希菌,

再通过不同的方法鉴定到种型,如分离到上述4种腹泻病原

菌,应立即向临床发出报告。

临床意义7.

7.1EHEC主要引起严重的出血性肠炎,临床表现为低热、

痉挛性腹痛,开始水样便,继而血样便。

7.2EPEC主要引起婴儿腹泻,伴有低热、呕吐和腹泻,黏液

便不带血。轻

者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。

7.3ETCC引起旅游者和婴幼儿腹泻的主要病原菌,临床表

现为水样腹泻、恶心、呕吐、寒战,有时发生脱水及中毒症

状。轻者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。

7.4EIEC要侵入结肠粘膜上皮,引起志贺菌样腹泻(粘液

脓血便),引起痢疾样腹泻,发热和肠炎,黏液血便,便中

有红、白细胞。

8.鉴定流程

挑菌落与分组

血清分型鉴定抗原不加热活菌与

分型血清作玻片凝集:加热抗原:100

1h与某型血清凝集必要时可作定型凝集

试验报告检出

粪便或肛拭子片凝

山梨醇平板

无色菌落

OK凝集

多价血清作玻

报告未

检出

不凝集

EPEC

及移种KIAMIU上的菌液与分型血清作玻片凝集)型EPECOL(

B××××.

不凝集报告未检出

粪、尿、残余

EPEC

符合大肠埃希菌

考参文献

.CNAS-CL23:2008[1]中国合格评定国家认可委员会

医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领

域.2008的应用说明

BBB编写人:AAA、操作人:本室操作人员

批准人:

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