
微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程
1.概述
致病性大肠埃希菌包括肠产毒型大肠埃希菌、肠致病型大肠
埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌和肠凝
聚型大肠埃希菌5群。与普通大肠埃希菌的生化反应相似,
应结合血清反应(O、H和K抗原)、毒性试验(ST和LT
肠毒素)和临床症状,分别鉴定5型致病性大肠埃希菌。
2.标本类型
粪便标本。
3.鉴定
3.1形态染色与一般大肠埃希菌相同。
3.2培养特性在麦康凯琼脂平板上形成不透明、粉红色或
无色菌落。
3.3生化反应与普通大肠埃希菌相似。
3.4鉴别要点在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落。
IMViC++--,
3.5不发酵或迟发酵山梨醇,为本菌的主要特征。
3.6操作步骤
3.6.1氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。
3.6.2致病型大肠埃希菌的鉴定
肠致病型大肠埃希菌(EPEC)婴幼儿水样或蛋花汤样分
型。O:H分型血清作EPEC便,鉴定为大肠埃希菌后用.
肠产毒型大肠埃希菌(ETEC)水样便,鉴定为大肠埃希
菌后需要测定ST和LT两种肠毒素及血清分型。ST的检查
可用兔肠段结扎试验,免疫学或分子生物学方法(DNA探针)
检测。
肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)细菌性痢疾样便,生化特性
与志贺菌相似,不发酵或迟发酵乳糖,赖氨酸脱羧酶阴性,
无动力,符合EIECO:H血清分型,豚鼠眼结膜试验、HELA
细胞侵入试验阳性。
肠出血型大肠埃希菌(EHEC)早期为水样便后为血便,有
50多个血清型,最具代表性的是O157:H7不发酵或迟发酵
山梨醇,在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落,可用
EHECO:H诊断血清进行分型。
4.药敏
参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI
M100-S20最新版本文件。
5.质量控制
参见质量管理程序。
6.检验结果解释与分析
疑似致病性大肠埃希菌感染,分离菌应先鉴定为大肠埃希菌,
再通过不同的方法鉴定到种型,如分离到上述4种腹泻病原
菌,应立即向临床发出报告。
临床意义7.
7.1EHEC主要引起严重的出血性肠炎,临床表现为低热、
痉挛性腹痛,开始水样便,继而血样便。
7.2EPEC主要引起婴儿腹泻,伴有低热、呕吐和腹泻,黏液
便不带血。轻
者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。
7.3ETCC引起旅游者和婴幼儿腹泻的主要病原菌,临床表
现为水样腹泻、恶心、呕吐、寒战,有时发生脱水及中毒症
状。轻者不用抗生素治疗,严重者需用抗生素治疗。
7.4EIEC要侵入结肠粘膜上皮,引起志贺菌样腹泻(粘液
脓血便),引起痢疾样腹泻,发热和肠炎,黏液血便,便中
有红、白细胞。
8.鉴定流程
挑菌落与分组
血清分型鉴定抗原不加热活菌与
分型血清作玻片凝集:加热抗原:100
1h与某型血清凝集必要时可作定型凝集
试验报告检出
粪便或肛拭子片凝
山梨醇平板
无色菌落
OK凝集
多价血清作玻
报告未
检出
不凝集
EPEC
及移种KIAMIU上的菌液与分型血清作玻片凝集)型EPECOL(
B××××.
不凝集报告未检出
粪、尿、残余
EPEC
符合大肠埃希菌
考参文献
.CNAS-CL23:2008[1]中国合格评定国家认可委员会
医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领
域.2008的应用说明
BBB编写人:AAA、操作人:本室操作人员
批准人:
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