分子杂交技术

DNA分子杂交技术

在高中生物教材中，多次提到DNA分子杂交技术，但爱伦坡短篇小说集 对于DNA分子杂交技术所用到的工具、

依据的原理及应用领域等都只是一带而过，让许多教师和学生深感疑惑，从而导致对此知识

理解不深，造成教学和学习上的困难。在此，笔者对其在高中生物教材中出现过的一些内容

进行补充介绍，以期加深理解，达到解疑释惑的目的。

1、什么叫DNA分子杂交技术？

DNA分子杂交技术又称DNA探针技术，是利用DNA分子的变性、复性以及碱基互补

配对的高度精确性，对某一特异甜糯米饭 性DNA序列进行探查的新技术。

2、DNA分子杂交技术的原理

DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形

成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,

再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两

种生物的DNA传递的英文 单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两

种生物DNA分子之间存在互补的部分,就能形成双学校鉴定 链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使

两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。

3、DNA分子杂交技术的工具军官职业化 ------ＤＮＡ探针

DNA探针是利用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的特定DNA片断，该片断可大至寄

生虫基因组DNA，小至20个碱基。DNA探针具有特异性；由于用放射性同位素（如32P）或

生物素标记探针，使杂交试验同时具有高度的敏感性。

4、DNA分子杂交技术的应用

(1)不同种生物之间亲缘关系的判断

不同种生物之间亲缘关系的判断，常采用比较不同生物DNA分子差异来进行,常用DNA分子

杂交法。二百字的日记 将两种生物的DNA分子单链放在一起剪纸动物 ,如果这两个单链具有互补的碱基序列,就会形

成杂合双链区。互补的碱基序列越多，形成的杂合双链区就越多，说明两种生物间的亲缘关南京吃喝玩乐

系就越近(如图)。或者是把两个物种的DNA单链融合在一起，然后对这条新的DNA加热。两

个物种DNA序列的相似程度越高，让这条DNA双链解开的温度也就越高。用这种方法，科学

家推测出黑猩猩和人的DNA相似程度是大约98．5％，黑猩猩是与人类亲缘关系最近的动物。

(2)基因诊断

基因诊断是上世纪70年代末迅速发展一项诊断技术，不仅及时推广应用于临床，并且也很

快的被公安部门采用来侦破刑事案件。基因诊断是利用DNA分子杂交等分子学技术直接探查

人体基因组DNA存在的缺损或基因表达产物的异常以及患病毒、细菌、寄生虫、真菌等感梁

性疾病时，病原体的基因组织或其基因的表达产物作出迅速正确诊断；并取量相微。病毒，

细菌等原体得入人体内后需要潜伏一定时间才能出现显示症状，因此采用通常形态学、生化

学或血清方法诊断很难及时诊断出来，往往延迟了有效的治疗时间；只有基因诊断技术才能

做到病原体尚没有出现症状前，就能作出准确的诊断。基因诊断是用放射性同位素(如32P)、

荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，

达到检测疾病的目的。例如，如何浪漫的表白 利用DNA探针可以迅速地检出肝炎患者的病叉烧是什么肉 毒，为肝炎的诊

断提供了一种快速简便的方法。目前用基因诊断方法已经能够检测出肠道病毒、单纯疱疹病

毒等许多种病毒。目前核酸分子杂交不但用来检测急性病人标本中的病毒DNA，也用于检测

不易分离培养的慢性感染、潜伏感染、整合感染病人标本中的病毒DNA。

(3)环境监测。

据报道，用DNA探针可以检测饮用水中病毒的含量。具体的方法是使用一个特定的DNA片段

制成探针，与被检测的病毒DNA杂交，从而把病毒检测出来。此方法的特点是快速、灵敏。

用传统方法进行检测，一次需要耗费几天或几个星期的时间，精确度也不高。用DNA探针只

需要花费一天的时间，并且能够大幅度地提高检测精度。

Southern杂交──DNA和DNA分子之间的杂交。目的基因是否整合到受体生物的

染色体DNA中，这在真核生物中是目的基因可否稳定存在和遗传的关键。如何证

明这一点，就需要通过Southern杂交技术。基本做法是：第一步，将受体生物

DNA提取出来，经过适当的酶切后，通过琼脂糖凝胶电泳，将不同大小的片段分

开；第二步，将凝胶上的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上；第三步，用标记了放

射性同位素的目的DNA片段作为探针与硝酸纤维素膜上的DNA进行杂交；第四步，

将X光底片压在硝酸纤维素膜上，在暗处使底片感光；第五步，将X光底片冲洗，

如果在底片上出现黑色条带（杂交带），则表明受体植物染色体DNA上有目的基

因。