碧生源减肥茶减肥机理及副作用研究

更新时间:2023-11-24 20:34:24 阅读: 评论:0

蝙蝠与雷达-暗示想念某人的句子

碧生源减肥茶减肥机理及副作用研究
2023年11月24日发(作者:谈恋爱的过程)

碧生源减肥茶减肥机理及副作用研究

夏之秋 高琦 朱宇广 朱月星

(中山大学中山医学院 临床医学05年级3, 广州 510080)

【目的】检测碧生源减肥茶的减肥效果,推测减肥机理及副作用;【方法】建立增肥

模型,肥胖大鼠及非肥胖大鼠各分为对照组(灌胃蒸馏水),低剂量组,高剂量组3组灌喂不同浓

度碧生源减肥茶,测量其体重变化、腹泻指数、胃内残留率、肠推进比、脂肪分解酶活性、小肠绒

毛形态学变化,以期衡量判定该减肥茶的减肥效果、减肥机理及副作用;【结果】服用减肥茶后正

常组3组体重变化未见显著性差异(P0.05), 增肥组3组体重变化未见显著性差异(P0.05)服用

减肥茶会导致腹泻,但高低剂量导致的腹泻情况差别不显著(P0.05)。与对照组相比,减肥茶高低

剂量组大鼠小肠各肠段(十二指肠、空肠、回肠)的绒毛高度、隐窝深度均有一定程度的变化。比

值(绒毛高度/隐窝深度)的均数也随剂量的增高而减小,变化无统计学意义(P0.05);对照组与低

剂量组及高剂量组的胃内残留率有显著性差异(P0.05);低剂量组及高剂量组的胃内残留率未见显

著性差异(P0.05)对照组,低剂量组,高剂量组的小肠推进比未见显著性差异(P0.05)【结论】

减肥效果:与蒸馏水相比,短时间内高低剂量碧生源减肥茶的减肥效果并不显著。减肥副作用:服

用碧生源减肥茶会造成腹泻,但高低剂量的减肥茶造成的腹泻情况差异不显著。在短时间内(1

内)内的腹泻并未对小肠粘膜的形态产生显著的影响。减肥机理:与蒸馏水相比,在短时间内并不

能促进胃内容物排空,相反会使得胃内食物潴留在胃内造成饱腹感抑制食欲;减肥茶服用后短期内

对小肠的蠕动没有促进作用。激素敏感性甘油三酯脂肪酶活性(HSL)的测定结果显示减肥茶可增

HSL活性。

关键词 碧生源减肥茶 减肥机理 副作用

前言

尿

使

便

西

,通,并

材料及方法

(一)试剂

1 碧生源减肥茶 规格2.5g/袋,120袋,北京澳特舒尔保健品开发有限公司生产。

2酶活性测定用到的试剂 台氏培养液50ml,盐酸肾上腺素1ml,戊巴比妥钠10ml,硬脂酸20ml

二乙基硫代氨基甲酸酯钠5ml,酪酸乙酯 20ml,三氯甲烷50ml,氢氧化钠10g,硝酸铜试剂50ml

抽提溶媒30ml(由中山大学生理实验室提供)。其中,台氏培养液:8g NaCl0.2g CaC120.2g

KCI MgC120.05g NaH2P041g NaHC031g葡萄糖,加水至1000ml。抽提溶媒:每

1000ml2mo1/L硫酸20m1,正己烷200ml,异丙醇780m1。硝酸铜试剂:每1000m11mol/L

三乙醇胺450m1,1 mol/L醋酸50m1, 5%硝酸铜500ml

(二)仪器 台式电子秤1,离心机1, 分光光度计1, 电热恒温培养箱1, 大鼠手术器械4(由

中山大学生理实验室提供)。代谢笼,由普通大鼠笼改装而成。减压蒸发仪1台(有中山大学药学院

实验室提供)

(三)实验动物及分组 健康雌性SD大鼠77只,体重155~222g(由中山大学北校区生理实验室

提供)。增肥模型建立期动物分组:将SD大鼠随机分为2组,正常组26只及增肥组41只。

减肥期动物分组:增肥模型建立后正常组筛选出21只,增肥组筛选出符合界定标准的21只大鼠进

入减肥实验。正常组及增肥组均各分为对照组,低剂量组,高剂量组三组,每组7只。

(四)动物模型建立

增肥模型的建立:正常组饲以基础饲料(由中山大学生理实验室提供)。增肥组饲以增肥饲料,配

方为:基础饲料粉末(760)、蛋黄粉(120),奶油(120)。增肥时间为13天。增肥模型建

立后,用Lees指数大于正常组平均Lees指数+1.5倍标准差的要求界定肥胖,从增肥组筛选出

大鼠21只进入减肥实验。正常组中筛选出21只进入减肥实验。

() 统计学处理 SPSS 11.0Excel for Windows XP

结果

1.增肥模型的建立

正常组26只大鼠饲以基础饲料,增肥组41只大鼠饲以增肥饲料13天后体重改变情况见表1

1 增肥模型建立前后大鼠体重变化情况(

xs

体重增加(g 分组 数量(只) 原始体重(g 13天后体重(g

38.46±12.25 正常组 26 188.88±17.11 227.35±14.63

48.63±18.71 增肥组 32 193.31±16.38 241.94±22.71

12.22±6.80 9239.44±16.49 251.67±20.87

a

a. 9只大鼠为200865日起进入增肥阶段,增肥时间为6天。

13天增肥阶段后,应用Lees指数大于对照组平均Lees指数+1.5倍标准差的要求界定肥胖,

筛选出21只增肥组大鼠进入减肥实验。另筛选出21只正常组大鼠进入减肥阶段。

2.减肥阶段大鼠体重变化情况

筛选后正常组及增肥组各有大鼠21只,每组随机分为对照组(蒸馏水),低剂量组(0.5g/只),

高剂量组(1.0g/只)3个组别进行减肥实验。每日定时(2200)称量体重,灌胃蒸馏水或减肥茶

1mL,7天后体重变化见表2

2 减肥阶段大鼠体重前后变化

分组 数量(只) 原始体重(g 7天后体重(g 体重变化(g 中位数(g

正常组 对照组N0 7 232.57±6.90 222.43±10.53 -10.14±9.12 -6.00

224.57±12.23 207.57±13.35 -17.00±15.51 -11.00 低剂量组N1 7

219.00±8.04 216.00±7.83 -3.00±5.83 -4.00 高剂量组N2 4

增肥组 260.14±16.84 248.29±19.46 -11.00±9.19 -11.00 对照组F0 7

260.57±8.90 241.571±26.08 -19.00±19.71 -13.00 低剂量组F1 7

259.00±16.88 246.29±23.30 -12.71±9.76 -11.00 高剂量组F2 7

正常组3NO, N1, N2的体重变化应用秩和检验,未见显著性差异(P0.05), 增肥组3FO, F1,

F2的体重变化应用秩和检验,未见显著性差异(P0.05)

3.腹泻指数

由表3可得,与对照组相比,减肥茶组(低剂量、高剂量)大鼠腹泻指数有明显差异,但是高低剂

量组之间的腹泻指数并无明显差异。

3 腹泻指数

稀便率 平均稀便级 腹泻指数

清水 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00

低剂量 0.77±0.22 3.94±0.11 3.01±0.84

高剂量 0.76±0.14 3.74±0.16 2.84±0.68

4.小肠粘膜形态观察

aaa

bbb

bbb

注:同一列数据后字母不同者,表示差异显著(P<0.05

在大鼠的不同肠段, 绒毛高度、隐窝深度不同。与对照组相比,减肥茶高低剂量组大鼠小肠各

肠段(十二指肠、空肠、回肠)的绒毛高度、隐窝深度均有一定程度的变化。比值(绒毛高度/隐窝

深度)的均数也随剂量的增高而减小。经统计学分析这些变化均无统计学意义,可能是标准差过大

所致。

4 减肥茶对大鼠小肠不同部分粘膜形态的影响

单位:

部位 对照组 低剂量组 高剂量组

十二指肠绒毛高度 248.47±50.76 263.41±52.59 251.71±50.35

隐窝深度 108.85±21.25 133.67±33.93 132.25±23.67

绒毛高度/隐窝深度 2.30±0.30 1.99±0.17 1.92±0.31

m

空肠绒毛高度 241.90±55.04 255.61±59.07 248.83±52.10

隐窝深度 101.84±14.73 115.25±23.10 114.92±18.39

绒毛高度/隐窝深度 2.38±0.27 2.22±0.16 2.17±0.18

回肠绒毛高度 167.83±28.54 169.49±24.63 169.00±33.28

隐窝深度 99.48±15.81 100.48±15.39 103.81±19.69

绒毛高度/隐窝深度 1.69±0.06 1.69±0.07 1.64±0.14

5.胃内残留率

从正常组和增肥组中随机选出对照组,低剂量组,高剂量组一定数量的大鼠处死后测定胃内残留率,

结果见表5

5 胃内残留率

分组 n 胃内残留率(%

对照组 4 43.1±11.7

低剂量组 5 67.4±16.8

高剂量组 4 84.2±25.6

对照组与低剂量组及高剂量组的胃内残留率应用秩和检验,有显著性差异(P0.05)低剂量组及高

剂量组的胃内残留率应用秩和检验,未见显著性差异(P0.05)。

6.小肠推进比

从正常组和增肥组中随机选出一定数量的大鼠处死后测定小肠推进比,结果见表6

6 小肠推进比

分组 n 小肠推进比(%

对照组 9 40.3±18.8

低剂量组 8 41.8±13.4

高剂量组 7 40.9±13.6

a

a. 对照组,低剂量组,高剂量组的小肠推进比应用秩和检验,未见显著性差异(P0.05)

7.激素敏感性脂肪酶(HSL)活性的测定

7.1体外HSL活性的测定

7.1.1

取不饥饿的雌性大白鼠,用20%乌拉坦腹腔麻醉后,取出肾周脂肪组织,室温下放入生理盐水

中备用。

称取脂肪组织每份200mg,共3份,分别用剪刀剪碎,放入20ml试管中,按下列条件分组:

(1)空白组:加入台式培养液4ml;

(2)阳性对照组:加入盐酸肾上腺素(Adr)0.1ml (20 ng/ml), 再加入台式培养液3.9ml

(3)测试药物组:加入碧生源减肥茶浓缩液0.1ml,再加入台式培养液3.9ml

样品在37℃环境下,振摇培养90min。然后从各培养管中分别吸取一定量的培养液,测定游离脂肪

酸的含量,结果以μmolFFA/200mg/90min表示。(测定方法见下述)

7.1.1标准曲线制备:

(1)称取0.003g脂肪酸钠固体于小烧杯中用于配制标准液,加入10% HCl0.5ml使脂肪酸钠转变为脂

肪酸,然后用10ml正己烷溶解脂肪酸,制成1.0μmol/ml 的脂肪酸溶液。吸取标准液0.1, 0.2

0.4, 0.6, 0.8, 1.0 ml(分别相当于游离脂肪酸含量为0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0μmol/ml

分别放入25ml试管中,加正己烷至5ml总量,再加3ml蒸馏水和抽提溶媒5ml摇均后,静置5min

(2)然后取上层液 4ml,放入到15ml的试管中,在60-70℃水浴蒸干溶剂,用3ml氯仿溶解残渣,

加硝酸铜试剂2.5ml,摇均后离心5min (2000 r/min)。仔细吸掉上面的水层,取下面的氯仿液2ml

加入到另一试管中。

(3)0.1%二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1 ml, 混匀后,用723分光光度仪在435nm波长下测定吸收

(试剂空白对照:2ml氯仿+0.1%二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1ml,混均)

7 标准曲线的测定

FFA标准液(ml 相当于浓度(umol/ml) 吸光值

0.5 0.1 0.048

1.0 0.2 0.058

2.0 0.4 0.077

3.0 0.6 0.091

(4)FFA含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线图。

1 标准曲线

7.13游离脂肪酸的含量测定

(1)0.25ml 培养液放入25ml试管中,加蒸馏水0.75ml和抽提液5ml充分摇均后,静置5min

再加2ml蒸馏水和正己烷5ml,充分摇均后,静置,使 两层分开,然后取上层液4ml,放入到15ml

的试管中,在60-70℃水浴蒸干溶剂。

(2)然后按照标准曲线制备项下“用5ml氯仿溶解残渣”起,依法测定吸收值,从标准曲线上读

出游离脂肪酸的含量。

8 各组游离脂肪酸含量(体外)

FFA溶液 吸光值 FFA含量(从标准曲线上读出)

空白组 0.062 0.04577

阳性对照组 0.068 0.04629

测试药物组 0.082 0.04836

7.1.4 FFA释放增加%的计算

阳性对照和各测定样品的FFA含量释放增加%的计算公式:

阳性对照FFA含量释放增加%=0.04629-0.04577/0.04577=1.13%

减肥茶FFA含量释放增加%=0.04836-0.04577/0.04577=5.67%

7.2体内HSL活性的测定

取分别灌清水与高低剂量减肥茶的雌性SD大鼠,20%乌拉坦腹腔麻醉后,取出肾周脂肪组织,

室温下放入生理盐水中备用。

每种大鼠称取脂肪组织200mg,共3份,分别用剪刀剪碎,放入20ml试管中,分组按灌胃的不

同分为A、清水组 B、低剂量减肥茶组 C、高剂量减肥茶组

样品在37℃环境下,振摇培养90min。然后从各培养管中分别吸取一定量的培养液,测定游离

脂肪酸的含量,结果以μmolFFA/200mg/90min表示。(测定方法同上)

9各组游离脂肪酸含量(体内)

FFA溶液 吸光值 FFA含量(从标准曲线上读出)

清水组 0.064 0.04594

低剂量减肥茶组 0.092 0.04836

高剂量减肥茶组 0.069 0.04637

低剂量减肥茶FFA含量释放增加%=0.04836-0.04594/0.04594=5.29%

高剂量减肥茶FFA含量释放增加%=0.04637-0.04594/0.04594=0.94%

讨论

1.碧生源减肥茶的减肥效果

由前面的结果部分中体重变化得到:

正常组:低剂量组体重减轻最多(-17.00±15.51g,对照组(-10.14±9.12g)次之,高剂量组

-3.00±5.83g)最少。应用体重变化的中位数分析得到同样结果。应用秩和检验对照组,低剂量

组及高剂量组的体重变化,未见显著性差异(P0.05

增肥组:低剂量组体重减轻最多(-19.00±19.71g,高剂量组(-12.71±9.76g)次之,对照组

-11.00±9.19g)最少。应用体重变化的中位数分析得到低剂量体重减轻最多,高剂量和对照组减

轻中位数一样。应用秩和检验对照组,低剂量组及高剂量组的体重变化,未见显著性差异,P0.05

分析实验结果,蒸馏水,低剂量及高剂量减肥茶在短期内均有减轻体重的效果。相较而言,低剂量

减轻最多,对照组和高剂量次之。推测减肥茶的减肥效果存在量效关系,在低剂量处或附近达到的

减肥效果高于在高剂量处所达到的减肥效果。但由于实验时间及条件所限,实验样本量较少导致体

重变化的标准差较大,应用统计检验未见显著差异。若增大样本量,并继续进行长期的体重跟踪记

录,得到的结果会更加稳定可靠。

2.腹泻指数

腹泻指数为稀便率与稀便级的乘积(稀便率为每只动物所排的稀便数与总便数之比;稀便级表

示稀便的程度。以稀便污染滤纸形成污迹面积的大小定级),它用以反映大鼠的腹泻情况。由数据分

析结果可得,对照组与减肥茶组的腹泻指数存在显著性差异,说明减肥茶较为显著地造成了大鼠的

腹泻。造成这一结果主要是因为碧生源减肥茶中含有绞股蓝、决明子、番泻叶等具有润肠通便作用

的有效成分。减肥茶高低剂量组的腹泻指数之间并不存在显著性差异,说明本实验中减肥茶的高低

剂量与大鼠腹泻指数并无显著联系。

3. 小肠粘膜形态观察

小肠是消化道营养物质消化和吸收的主要部位。绒毛高度与隐窝深度反映了肠道的功能状态和健

康状况。绒毛萎缩,意味着成熟细胞减少,吸收功能下降。隐窝深度反映了细胞的生成率,隐窝变

浅,表明细胞成熟率上升,分泌功能增强。绒毛高度/隐窝深度的比值则综合反映了小肠的功能状态。

比值下降,表明粘膜受损,消化吸收功能下降,常伴有腹泻发生;反之,肠粘膜消化吸收功能增强,

腹泻率下降。长期腹泻会导致大鼠小肠壁超微结构发生变化。本实验的结果表明,与对照组相比,

减肥茶组(高剂量、低剂量)大鼠的小肠各段绒毛高度,隐窝深度以及绒毛高度/隐窝深度的比值均

无显著性差异。这表明在短时间内(1周内),减肥茶虽然导致了腹泻,但并未对小肠粘膜的形态产

生显著的影响。推测在长时间用药的情况下,减肥茶会对小肠粘膜的形态产生较为显著的影响。

4.碧生源减肥茶对大鼠胃肠消化功能的作用

4.1胃内排空率:统计分析得对照组与低剂量组及高剂量组的胃内残留率有显著性差异(P0.05)

低剂量组及高剂量组的胃内残留率未见显著性差异(P0.05)。这说明减肥茶与蒸馏水相比,在短

时间内并不能促进胃内容物排空,相反会使得胃内食物潴留在胃内。推测碧生源减肥茶服用后会使

得胃排空能力下降,不利于将食物排入十二指肠,使人产生饱腹感而抑制食欲。

4.1小肠推进比:统计分析得对照组,低剂量组,高剂量组的小肠推进比未见显著性差异(P0.05)

结合前面腹泻指数的讨论,推测减肥茶短期内不会促进胃内容物排空,食物积聚在胃内产生的饱腹

感抑制进食;减肥茶服用后短期内对小肠的蠕动没有促进作用。服用减肥茶9小时内灌胃过减肥茶

的大鼠腹泻严重,说明进食后需一定时间减肥茶才能开始发挥作用,将食物排出体外,达到减肥目

的。如进行进一步实验,可考虑在灌胃减肥茶后10小时内设立时间梯度进行小肠推进比的测定,

判断减肥茶发挥作用的开始时间。

5. 激素敏感性脂肪酶活性的测定

激素敏感性脂肪酶HSL是将脂肪组织中甘油三酯水解成游离脂肪酸(FFA)和甘油脂肪酸的限

速酶,FFA进入可被氧化分解转化为能量,此即脂肪的动员过程。脂肪动员产生FFA是许多减肥药

物产生作用的首要环节。脂肪组织释放FFA越多,说明激素敏感性脂肪酶的活性越强,因此可以通

过测定一定条件下离体脂肪组织所释放FFA的量来考察该酶的活性。因此把减肥茶提取液对激素敏

感性脂肪酶活性的影响作为减肥效果的主要指标。

5.1体外检测结果:

利用体外试验来验证减肥茶,具有操作简单、速度快,能排除生活习惯对试验结果的影响等优

点。就测量结果来说,阳性对照FFA含量释放增加1.13%,减肥茶FFA含量释放增加5.67%。说

明减肥茶对HSL具有促进酶活性作用,但不很明显。

经分析,造成这一结果的原因一方面是由于没有恒温振荡器进行组织培养,使总体结果偏小;

另一方面是操作不太熟练,,使定量过程有些粗糙,加大了人为误差。

5.2体内检测结果:

低剂量减肥茶FFA含量释放增加5.29%,而高剂量减肥茶FFA含量释放增加0.94%。说明减

肥茶可提高HSL活性。

这一结论是建立在如下实验情况下:

由于体内HSL酶活性的测量是和小肠推进比同期测量,此时大鼠已饥饿一天,体内消耗的主要

营养物质可能已经由糖类转变为脂肪, HSL酶活性可能已经提高。另外从培养液中提取出脂肪酸,

中间过程及加样步骤较多,人为因素影响比较大。为进一步获得更具统计意义的检测结果,考虑在

后续实验中加大样本量,精细化实验步骤,以期得到更为准确可靠的结果。

因此关于激素敏感性脂肪酶活性的测定这一环节由于前面分析的多种原因,导致结果的精确性

和可信度不高,作为参考部分一并写入。

结论

1.减肥效果:与蒸馏水相比,短时间内高低剂量碧生源减肥茶的减肥效果并不显著。

2.减肥副作用:服用碧生源减肥茶会造成腹泻,但高低剂量的减肥茶造成的腹泻情况并无显著差异。

在短时间内(1周内)内的腹泻并未对小肠粘膜的形态产生显著的影响。

3.减肥机理:

与蒸馏水相比,在短时间内并不能促进胃内容物排空,相反会使得胃内食物潴留在胃内而致饱

腹感抑制食欲,短时间内对小肠蠕动没有促进作用。

HSL活性的测定结果显示减肥茶可增强HSL活性。

致谢:感谢中山大学生理实验室对实验的技术仪器支持,感谢汪雪兰老师,罗汉川老师,李志慧老

师给予的指导和鼓励。

――――――――――――――――――

收稿日期:20077月。

作者简介:夏之秋(1986-),女,汉族,吉林省长春市人,8年制三年级本科生, E-mail: xzhqzzhsh@sina,电话:

************

参考文献

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