一次性微载体消化袋的制作方法
1.本实用新型涉及细胞消化技术领域，具体的说是涉及一次性微载体消化袋。
背景技术：
2.目前市场上没有用于消化微载体的袋体。目前市场上成熟的消化器体积通常比较大，需要用的细胞消化液比较多，并带有搅拌桨，其通常会存在如下缺点：1)操作复杂，操作时间周期长；2)消化液用量多；3)桨叶搅拌时，对细胞损伤较大，会降低细胞活力，特别是对于敏感的贴壁细胞；
3.4)操作前需要复杂的除内毒素、清洗、组装及灭菌等处理；5)重复使用时，需要进行sip，cip等验证工作，会增加生产成本。
技术实现要素：
4.针对背景技术中的问题，本实用新型的目的在于提供一次性微载体消化袋。
5.为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案如下：
6.一次性微载体消化袋，包含一次性袋体及设置在一次性袋体内的过滤网，所述过滤网固定在所述一次性袋体内或活动设置在所述一次性袋体内，在所述一次性袋体的上表面设置有一个第一进液管接头a、一个第二进液管接头a、一个第一出液管接头a及一个第二出液管接头a，在所述过滤网上设置一个第三出液管接头，所述第一进液管接头a通过第一进液管对应与一个第一进液管接头b相连，所述第二进液管接头a通过第二进液管对应与多个第二进液管接头b相连，所述第一出液管接头a通过第一出液管对应与一个第一出液管接头b相连，所述第二出液管接头a一端通过第二出液管对应与所述第三出液管接头相连，另一端通过第三出液管对应与一个或多个第二出液管接头b相连。
7.进一步，在所述一次性袋体的上表面还设置一个取样管接头a，且所述取样管接头a通过取样管对应与一个取样管接头b相连。
8.进一步，所述过滤网的网孔径为1～100μm。
9.进一步，所述第一进液管接头b用于与外部微载体悬浮液供给系统相连，并用于向一次性袋体内输入微载体悬浮液。
10.进一步，所述第一出液管接头b对应与一个第一储液袋相连。
11.进一步，所述第二进液管接头b的数量有三个，且三个第二进液管接头b分别对应与外部消化液供给系统、外部消化终止液供给系统及外部缓冲液供给系统相连，并分别对应用于向一次性袋体内输入消化液、消化终止液及缓冲液。
12.进一步，所述第二出液管接头b的数量有一个且对应与一个第二储液袋相连。
13.进一步，所述第二出液管接头b的数量有两个，且其中一个对应与一个第二储液袋相连，另一个对应与一个第三储液袋相连。
14.进一步，在所述一次性袋体的两端均还分别设置有一个固定压边，在每个固定压边内均封装有一个固定棒。
15.与现有技术相比，本实用新型的优点是：
16.1、为一次性产品，无需清洁验证，无需清洗，可节约大量注射用水。
17.2、操作简单，可用于微载体和培养液的快速分离，以及微载体和细胞的快速分离。
18.3、无机械搅拌，对细胞损伤较小，细胞收获活率比传统罐体收获方式更高。
19.4、细胞回收率更高。
20.5、消化中止后，可以直接将消化袋做转移袋用，直接无菌连接到下一级反应器，减少了无菌操作步骤，降低了污染风险。
21.6、带有取样系统，可以随时取样，判断消化终止点。
附图说明
22.图1为本实用新型一次性微载体消化袋的一种实施例的正面示意图；
23.图2为本实用新型一次性微载体消化袋的另一种实施例的正面示意图；
24.图3为图1或图2一次性微载体消化袋实施例中一次性袋体的正面示意图；
25.图4为一次性袋体一种实施例的剖视图；
26.图5为一次性袋体另一种实施例的剖视图；
27.附图标记说明：1、一次性袋体；2、过滤网；3、微载体；4、第一进液管接头a；5、第二进液管接头a；6、第一出液管接头a；7、第二出液管接头a；8、第三出液管接头；9、取样管接头a；10、第一进液管；11、第一进液管接头b；12、第二进液管；13、第二进液管接头b；14、第一出液管；15、第一出液管接头b；16、第二出液管；17、第三出液管；18、第二出液管接头b；19、取样管；20、取样管接头b；21、第一储液袋；22、第二储液袋；23、第三储液袋；24、固定压边；25、固定棒。
具体实施方式
28.为使本实用新型实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合附图和具体实施方式，进一步阐述本实用新型是如何实施的。
29.参阅图1、图3及图4所示，为本实用新型一次性微载体消化袋的一种实施例，包含一次性袋体1及固定设置在一次性袋体1内且将一次性袋体1内腔分隔成上下两个容腔的过滤网2，在一次性袋体1的上表面设置有一个第一进液管接头a4、一个第二进液管接头a5、一个第一出液管接头a6及一个第二出液管接头a7，在过滤网2上设置一个第三出液管接头8，第一进液管接头a4通过第一进液管10对应与一个第一进液管接头b11相连，第二进液管接头a5通过第二进液管12对应与三个第二进液管接头b13相连，第一出液管接头a6通过第一出液管14对应与一个第一出液管接头b15相连，第二出液管接头a7一端通过第二出液管16对应与第三出液管接头8相连，另一端通过第三出液管17对应与一个第二出液管接头b18相连。
30.具体地说，在本实施例中，在一次性袋体1的上表面还设置一个取样管接头a9，且取样管接头a9通过取样管19对应与一个取样管接头b20相连。
31.具体地说，在本实施例中，过滤网2的网孔径为1～100μm，优选为75～85μm。
32.具体地说，在本实施例中，第一进液管接头b11用于与外部微载体悬浮液供给系统相连，并用于向一次性袋体1内输入微载体悬浮液。其中，微载体悬浮液是指含有微载体3的
细胞悬浮液。
33.具体地说，在本实施例中，第一出液管接头b15对应与一个第一储液袋21相连，用于将一次性袋体1内消化完成后的液体(含有微载体3、细胞、消化液、终止液、缓冲液的混合溶液)输出到第一储液袋21中。
34.具体地说，在本实施例中，第二出液管接头b18对应与一个第二储液袋22相连，用于将一次性袋体1内的微载体悬浮液输出到第二储液袋22中。其中，微载体悬浮液是指不含微载体3的细胞悬浮液。
35.具体地说，在本实施例中，三个第二进液管接头b13分别对应与外部消化液供给系统、外部消化终止液供给系统及外部缓冲液供给系统，并分别对应用于向一次性袋体1内输入消化液、消化终止液及缓冲液。其中，消化液优选为胰蛋白酶消化液；消化终止液优选为10％培养基。
36.具体地说，在本实施例中，在一次性袋体1的两端均还分别设置有一个固定压边24，在每个固定压边24内均封装有一个固定棒25。
37.具体地说，本实施例的使用步骤具体如下：
38.第一步、依次从第一进液管接头b11、第一进液管10及第一进液管接头a4向一次性袋体1内加入微载体悬浮液(即含有微载体3的细胞悬浮液)；
39.第二步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第二储液袋22相连的一个第二出液管接头b18将一次性袋体1内的微载体悬浮液(即不含微载体3的细胞悬浮液)输出到第二储液袋22中；
40.第三步、依次从与外部缓冲液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入缓冲液，对一次性袋体1内的微载体3进行冲洗，直至一次性袋体1内的液体变得清澈为止；
41.第四步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第二储液袋22相连的一个第二出液管接头b18将一次性袋体1内的冲洗完成后的液体(即不含微载体3的冲洗液)输出到第二储液袋22中；
42.第五步、依次从与外部消化液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入消化液(如：胰蛋白酶消化液)，进行细胞消化；
43.第六步、从取样管接头20处取一次性袋体1内的微载体消化悬浮液，在外部用显微镜观察其消化情况，判断其消化是否完成；若观察到微载体消化悬浮液中微载体3上附着的细胞被消化差不多时(例如：有80％细胞从其附着的微载体3上剥离下来时)，即进入到第七步进行细胞终止消化；否则，继续执行消化步骤，直至微载体3上附着的细胞被消化差不多时止；
44.第七步、依次从与外部消化终止液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入消化终止液(如：10％培养基)，终止细胞消化；
45.第八步、依次从第一出液管接头a6、第一出液管14及第一出液管接头b15将一次性袋体1内终止消化后的液体(含微载体3、细胞、消化液、终止液、缓冲液的混合溶液)输出到第一储液袋21中。
46.参阅图2所示，为本实用新型一次性微载体消化袋的另一种实施例，其第一种实施例的区别在于：第二出液管接头b18的数量有两个，且其中一个对应与一个第二储液袋22相
连，用于将一次性袋体1内的微载体悬浮液(即不含微载体3的细胞悬液)输出到第二储液袋22中，另一个对应与一个第三储液袋2相连，用于将一次性袋体1内消化完成后的细胞悬液(即不含为微载体3，含细胞、消化液、终止液、缓冲液的混合液)输出到第三储液袋23。
47.具体地说，本实施例的使用步骤具体如下：
48.第一步、依次从第一进液管接头b11、第一进液管10及第一进液管接头a4向一次性袋体1内加入微载体悬浮液(即含有微载体3的细胞悬浮液)；
49.第二步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第二储液袋22相连的一个第二出液管接头b18将一次性袋体1内的微载体悬浮液(即不含微载体3的细胞悬浮液)输出到第二储液袋22中；
50.第三步、依次从与外部缓冲液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入缓冲液，对一次性袋体1内的微载体3进行冲洗，直至一次性袋体1内的液体变得清澈为止；
51.第四步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第二储液袋22相连的一个第二出液管接头b18将一次性袋体1内的冲完成洗后的液体(即不含微载体3的冲洗液)输出到第二储液袋22中；
52.第五步、依次从与外部消化液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入消化液(如：胰蛋白酶消化液)，进行细胞消化，
53.第六步、从取样管接头20处取一次性袋体1内的微载体消化悬浮液，在外部用显微镜观察其消化情况，判断其消化是否完成；若观察到微载体消化悬浮液中微载体3上附着的细胞被消化差不多时(例如：有80％细胞从其附着的微载体3上剥离下来时)，即进入到第七步进行细胞终止消化；否则，继续执行消化步骤，直至微载体3上附着的细胞被消化差不多时止；第七步、依次从与外部消化终止液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入消化终止液(如：10％培养基)，终止细胞消化；
54.第八步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第三储液袋23相连的另一个第二出液管接头b18将一次性袋体1内终止消化后的液体(含不含微载体3，含细胞、消化液、终止液、缓冲液的混合溶液)输出到第三储液袋23中；
55.第九步、从与外部缓冲液供给系统相连的一个第二进液管接头b13及第二进液管12向一次性袋体1内加入缓冲液，对第八步终止消化后的微载体3进行冲洗，直至一次性袋体1内的液体变得清澈为止；
56.第十步、依次从第三出液管接头8、第二出液管16、第二出液管接头a7、第三出液管17及与第三储液袋23相连的另一个第二出液管接头b18将第九步冲洗完的液体(不含微载体3，含细胞及缓冲液)输出到第三储液袋23中。
57.参阅图5所示，为本实用新型一次性微载体消化袋的又一种实施例，其与上述两种实施例的区别在于：过滤网2是活动设置在一次性袋体1内，不与一次性袋体1内壁连接，当向一次性袋体1内通入液体时，过滤网2可活动漂浮在一次性袋体1内的液体中。
58.具体地说，在上述实施例中，一次性袋体1的规格可以根据实际需要选择，例如：可以为15l、20l、25l、50l、100l。
59.具体地说，在上述实施例中，一次性袋体1采用柔性材质制成，例如：由pe和evoh材料复合而成的。
60.具体地说，在上述实施例中，各进液管及出液管均采用热缩管制成，各管接头均采用无菌快接头。
61.最后说明，以上所述仅为本实用新型的实施例，并非因此限制本实用新型的专利范围，凡是利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本实用新型的专利保护范围内。
技术特征：
1.一次性微载体消化袋，包含一次性袋体(1)及设置在一次性袋体(1)内的过滤网(2)，其特征在于：所述过滤网(2)固定在所述一次性袋体(1)内或活动设置在所述一次性袋体(1)内，在所述一次性袋体(1)的上表面设置有一个第一进液管接头a(4)、一个第二进液管接头a(5)、一个第一出液管接头a(6)及一个第二出液管接头a(7)，在所述过滤网(2)上设置一个第三出液管接头(8)，所述第一进液管接头a(4)通过第一进液管(10)对应与一个第一进液管接头b(11)相连，所述第二进液管接头a(5)通过第二进液管(12)对应与多个第二进液管接头b(13)相连，所述第一出液管接头a(6)通过第一出液管(14)对应与一个第一出液管接头b(15)相连，所述第二出液管接头a(7)一端通过第二出液管(16)对应与所述第三出液管接头(8)相连，另一端通过第三出液管(17)对应与一个或多个第二出液管接头b(18)相连。2.根据权利要求1所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：在所述一次性袋体(1)的上表面还设置一个取样管接头a(9)，且所述取样管接头a(9)通过取样管(19)对应与一个取样管接头b(20)相连。3.根据权利要求1所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述过滤网(2)的网孔径为1～100μm。4.根据权利要求3所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述第一进液管接头b(11)用于与外部微载体悬浮液供给系统相连，并用于向一次性袋体(1)内输入微载体悬浮液。5.根据权利要求4所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述第一出液管接头b(15)对应与一个第一储液袋(21)相连。6.根据权利要求5所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述第二进液管接头b(13)的数量有三个，且三个第二进液管接头b(13)分别对应与外部消化液供给系统、外部消化终止液供给系统及外部缓冲液供给系统相连，并分别对应用于向一次性袋体(1)内输入消化液、消化终止液及缓冲液。7.根据权利要求6所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述第二出液管接头b(18)的数量有一个且对应与一个第二储液袋(22)相连。8.根据权利要求6所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：所述第二出液管接头b(18)的数量有两个，且其中一个对应与一个第二储液袋(22)相连，另一个对应与一个第三储液袋(23)相连。9.根据权利要求1所述的一次性微载体消化袋，其特征在于：在所述一次性袋体(1)的两端均还分别设置有一个固定压边(24)，在每个固定压边(24)内均封装有一个固定棒(25)。
技术总结
本实用新型公开了一次性微载体消化袋，包含一次性袋体及设在一次性袋体内的过滤网，在一次性袋体上表面设有第一进液管接头A、第二进液管接头A、第一出液管接头A及第二出液管接头A，在过滤网上设有第三出液管接头，第一进液管接头A通过第一进液管与一个第一进液管接头B相连，第二进液管接头A通过第二进液管与多个第二进液管接头B相连，第一出液管接头A通过第一出液管与一个第一出液管接头B相连，第二出液管接头A一端通过第二出液管与第三出液管接头相连，另一端通过第三出液管与一个或多个第二出液管接头B相连。本实用新型优点有：为一次性产品，无需清洁验证，生产成本低；无机械搅拌，对细胞损伤较小，细胞收获活率高。细胞收获活率高。细胞收获活率高。
