一种利用离心混匀的PCR快速检测芯片的制作方法
一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片
技术领域
1.本实用新型涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片。
背景技术：
2.聚合酶链反应(polymerase chain reaction，pcr)是利用一段dna为模板，在dna聚合酶和核苷酸底物共同参与下，将该段dna扩增至足够数量，以便进行结构和功能分析。pcr检测方法在临床上快速诊断细菌性传染病等方面具有极为重要的意义。
3.pcr检测是临床上快速诊断细菌性传染病的重要检测手段，相对常规pcr检测方法，由于pcr技术的操作比较繁琐，对环境要求高，操作过程中容易造成污染而导致结果出现假阳性，从而会影响检测结果的准确性。
4.因此亟需提供一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片来解决上述问题。
技术实现要素：
5.本实用新型所要解决的技术问题是相对常规pcr检测方法，由于pcr技术的操作比较繁琐，对环境要求高，操作过程中容易造成污染而导致结果出现假阳性。
6.为解决上述技术问题，本实用新型采用的一个技术方案是：提供一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，包括壳体，所述壳体内自上而下依次设置有采样槽、混匀槽和反应槽；
7.所述混匀槽内含有pcr反应底物，pcr反应底物包括pcr酶、mg离子、两端引物以及检测探针，pcr酶采用tag酶，如使用恒温pcr方法，可采用恒温pcr扩增酶；检测用引物和探针，根据不同的检测目标及需要，选用相应的引物和探针；
8.所述采样槽和混匀槽之间设置有微通道一，所述混匀槽和反应槽之间设置有微通道二；
9.所述采样槽底部中心开设有与微通道一相对应的进样通孔。
10.本实用新型进一步设置为：所述壳体是透明的。
11.通过上述技术方案，使得整个监测反应过程和检测结果均可见。
12.本实用新型进一步设置为：所述壳体是采用pmma(聚甲基丙烯酸甲酯)材料制作而成。
13.通过上述技术方案，采用pmma材料制作而成的壳体不仅整体结构稳定。
14.本实用新型进一步设置为：所述采样槽为倒梯形结构。
15.通过上述技术方案，使得样品可以通过微量移液器注入到采样槽中，然后经进样通孔进入微通道一中。
16.本实用新型进一步设置为：所述pcr反应底物为冻干粉剂。
17.本实用新型进一步设置为：所述混匀槽底端开设有与微通道二相对应的样品出样孔。
18.通过上述技术方案，使得在混匀槽中混匀后的样品可以在重力的引导下，通过微通道二进入到反应槽中。
19.本实用新型进一步设置为：所述采样槽、混匀槽和反应槽之间通过微通道一和微通道二相贯通。
20.本实用新型的有益效果如下：
21.1.本实用新型通过设计简单的快速检测芯片，不仅技术简单实用，稳定性高，芯片封闭性好，同时也降低了污染等问题，能够很好的在检测方面取代现有pcr检测技术；
22.2.本实用新型利用芯片的构架，可以将pcr反应底物冻干粉的形式提前置于混匀槽中，通过离心的方法，可以将样本缓慢的导入混匀槽中与反应底物充分混匀，然后再通过离心的方法将已经混合的反应标本进入到反应槽中，通过特定的反应加热器，进行pcr反应，再利用相关的检测仪器进行检测，保证了检测结构的准确性，不会出现假阳性的情况。
附图说明
23.图1为本实用新型的立体图；
24.图2为本实用新型的俯视图；
25.图3为图2中a-a向剖视图。
26.图中：1、采样槽；2、微通道一；3、混匀槽；4、微通道二；5、反应槽；6、壳体；7、进样通孔。
具体实施方式
27.下面结合附图对本实用新型的较佳实施例进行详细阐述，以使本实用新型的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本实用新型的保护范围做出更为清楚明确的界定。
28.请参阅图1和图2，一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，包括壳体6，壳体6是透明的，使得整个监测反应过程和检测结果均可见；壳体6是采用pmma(聚甲基丙烯酸甲酯)材料制作而成，采用pmma材料制作而成的壳体6不仅整体结构稳定；
29.如图3所示，壳体6内自上而下依次设置有采样槽1、混匀槽3和反应槽5，采样槽1为倒梯形结构，使得样品可以通过微量移液器注入到采样槽1中，然后经进样通孔7进入微通道一2中；
30.混匀槽3内含有pcr反应底物，pcr反应底物包括pcr酶、mg离子、两端引物以及检测探针，pcr反应底物为冻干粉剂，pcr酶采用tag酶，如使用恒温pcr方法，可采用恒温pcr扩增酶；检测用引物和探针，根据不同的检测目标及需要，选用相应的引物和探针；
31.如图3所示，采样槽1和混匀槽3之间设置有微通道一2，混匀槽3和反应槽5之间设置有微通道二4，混匀槽3底端开设有与微通道二4相对应的样品出样孔，使得在混匀槽3中混匀后的样品可以在重力的引导下，通过微通道二4进入到反应槽5中；
32.采样槽1底部中心开设有与微通道一2相对应的进样通孔7，采样槽1、混匀槽3和反应槽5之间通过微通道一2和微通道二4相贯通；
33.结果判断：
34.以恒温pcr为例，采用恒温pcr反应底物，将芯片进入到恒温水浴锅中，注意将芯片
垂直放入水中，芯片采样槽1高于水平面，防止水进入到芯片中，反应条件为56℃，2小时；
35.以fitc荧光探针为例，激发光波长为490-495nm，发射光波长为520-530nm，呈明显黄绿荧光。对反应后的芯片，可利用相应的荧光检测仪进行定性和定量检测，也通过激发波长为490-495nm的特殊手电筒，直接照射反应区，如果出现黄绿荧光，可证明为阳性，透明无为阴性，能够直接进行定性检测。
36.本实用新型在使用时，将芯片垂直放置，把已经处理好的样品(20ul)通过微量移液器注入到采样槽1，然后将芯片垂直入到离心机中，利用离心沉淀的方法，离心速度为500g/min，离心时间为10分钟，在离心力的引导下，采样槽1中的样本通过微通道一2导入到含有pcr反应底物的混匀槽3中，样本进入混匀槽中3快速混匀后，在重力的引导下，通过微通道二4进入到反应槽5中，经离心10分钟后取出芯片，按照pcr反应条件，进行加热反应，然后可通过相关的检测仪器进行观察荧光值并定性或定量检测。
37.以上所述仅为本实用新型的实施例，并非因此限制本实用新型的专利范围，凡是利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本实用新型的专利保护范围内。
技术特征：
1.一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，包括壳体(6)，其特征在于：所述壳体(6)内自上而下依次设置有采样槽(1)、混匀槽(3)和反应槽(5)；所述混匀槽(3)内含有pcr反应底物；所述采样槽(1)和混匀槽(3)之间设置有微通道一(2)，所述混匀槽(3)和反应槽(5)之间设置有微通道二(4)；所述采样槽(1)底部中心开设有与微通道一(2)相对应的进样通孔(7)。2.根据权利要求1所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述壳体(6)是透明的。3.根据权利要求2所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述壳体(6)是采用pmma材料制作而成。4.根据权利要求1所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述采样槽(1)为倒梯形结构。5.根据权利要求1所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述pcr反应底物为冻干粉剂。6.根据权利要求1所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述混匀槽(3)底端开设有与微通道二(4)相对应的样品出样孔。7.根据权利要求6所述的一种利用离心混匀的pcr快速检测芯片，其特征在于：所述采样槽(1)、混匀槽(3)和反应槽(5)之间通过微通道一(2)和微通道二(4)相贯通。
技术总结
本实用新型公开了一种利用离心混匀的PCR快速检测芯片，包括壳体，所述壳体是透明的，所述壳体是采用PMMA材料制作而成，所述壳体内自上而下依次设置有采样槽、混匀槽和反应槽，所述采样槽为倒梯形结构；所述混匀槽内含有PCR反应底物，所述PCR反应底物为冻干粉剂；所述采样槽和混匀槽之间设置有微通道一，所述混匀槽和反应槽之间设置有微通道二；所述采样槽底部中心开设有与微通道一相对应的进样通孔，所述混匀槽底端开设有与微通道二相对应的样品出样孔。本实用新型通过设计简单的快速检测芯片，不仅技术简单实用，稳定性高，芯片封闭性好，同时也降低了污染等问题，能够很好的在检测方面取代现有PCR检测技术。测方面取代现有PCR检测技术。测方面取代现有PCR检测技术。
