离子色谱法测定葡萄酒中的山梨酸和苯甲酸的含量

离子色谱法测定葡萄酒中的山梨酸和苯甲酸的含量

陈志涛;张睿;郑香平;刘美华;陈春添;黄菁菁

【摘 要】采用离子色谱法快速测定葡萄酒中的山梨酸和苯甲酸的含量.样品经超纯

水稀释20倍,用聚酰胺粉末吸附提取溶液中的色素,净化液在IonPac AS11-HC阴

离子色谱柱上分离,以30 mmol·L-1氢氧化钾溶液为淋洗液,采用抑制电导检测器检

测,外标法定量.山梨酸和苯甲酸的质量浓度均在0.5～50 mg·L-1范围内与峰面积

呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在1.4～1.7mg·L-1之间.加标回收率在97.7％～

104％之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.4％～3.4％之间.

【期刊名称】《理化检验-化学分册》

【年(卷),期】2015(051)012

【总页数】3页(P1658-1660)

【关键词】离子色谱法;山梨酸;苯甲酸;葡萄酒

【作 者】陈志涛;张睿;郑香平;刘美华;陈春添;黄菁菁

【作者单位】福清出入境检验检疫局,福清350300;福清出入境检验检疫局,福清

350300;福清出入境检验检疫局,福清350300;福建师范大学福清分校,福清

350300;福清出入境检验检疫局,福清350300;福清出入境检验检疫局,福清

350300

【正文语种】中 文

【中图分类】O657.7

山梨酸和苯甲酸具有抑制微生物增殖或杀死微生物的作用，是我国在食品工业生产

中规定可使用的防腐剂。但是过量食用山梨酸和苯甲酸会给人体健康带来危害

［1-3］，特别是肝脏器官。因此GB 2760-2014食品添加剂使用卫生标准对各种

食品中山梨酸和苯甲酸的最大添加量做了相应的规定，葡萄酒［4］中可添加的山

梨酸和苯甲酸的质量浓度分别不超过200 mg·L-1和50 mg·L-1。为了准确测定葡

萄酒中的山梨酸和苯甲酸含量，保证葡萄酒的安全，开发一种操作简便、成本低廉，

快速测定葡萄酒中的山梨酸和苯甲酸的方法具有重要的现实意义。

目前，测定山梨酸和苯甲酸的方法有毛细管电泳法［5-6］、气相色谱法［7-8］、

高效液相色谱法［9-11］和离子色谱法［12］等。其中高效液相色谱法应用较多，

以有机溶剂作为流动相会对环境和人体产生一定的危害；离子色谱法以氢氧化钾溶

液作为流动相，比较安全、环保，并且分析成本较低，检测速度更快。本工作建立

了离子色谱法同时测定葡萄酒中的山梨酸和苯甲酸食品添加剂的含量，采用分散固

相萃取法，操作简便，适合应用于日常检测。

1.1 仪器与试剂

ICS-2100型离子色谱仪，配EGCⅢKOH淋洗液自动发生装置和ASRS-300阴离

子自动再生电解抑制器，Milli Q型超纯水机，XW-80型旋涡混合器，Sigma，

3K15型离心机。

混合标准储备溶液：分别移取1 000 mg·L-1山梨酸溶液、1 000 mg·L-1苯甲酸

溶液各1.0 m L于5 m L容量瓶中，用水稀释至刻度。使用时用水逐级稀释至所

需的质量浓度。

山梨酸标准储备溶液：1 000 mg·L-1。

苯甲酸标准储备溶液：1 000 mg·L-1。

试验用水均为超纯水，电阻率为18.2 MΩ· cm。

1.2 仪器工作条件

IonPac AS11-HC阴离子交换色谱柱（250 mm×4 mm）；流量1.1 m L·min-1；

进样量25μL；抑制电流112 mA；柱温30℃；检测池温度30℃；检测器为电导

检测器；洗脱条件：淋洗液发生器产生的30 mmol·L-1氢氧化钾溶液为流动相。

1.3 试验方法

移取葡萄酒试样0.5 mL于10 mL比色管中，用水定容至10 mL，加聚酰胺0.2 g，

涡旋振荡30 s，以3 500 r·min-1转速离心5 min，移取上清液至进样瓶中，在

仪器工作条件下进行测定。

2.1 提取与净化

将葡萄酒样品溶液进行适当的稀释，降低基质背景对分析的影响，试验考察了样品

溶液稀释5，10，15，20，25，30倍后的测定效果，结果表明：样品溶液稀释

20倍以上时，基质背景均较低，对山梨酸和苯甲酸的测定影响小，可得到满意的

测定结果。

葡萄酒中含有大量的色素，特别是红葡萄酒，色素的分子结构都较大，有较强的吸

附作用，容易吸附在分离柱上，影响了分析的准确性，也缩短了分离柱的使用寿命。

聚酰胺粉对色素具有很强的吸附作用，可同时吸附人工色素和天然色素，对葡萄酒

样品溶液的净化效果好，试验采用分散固相萃取法。

2.2 色谱条件的选择

由于待测物在色谱柱上的保留特性相差较大，在色谱上可有效地分离，但当流动相

的流量太大时，葡萄酒样品溶液中含有的其他成分容易对山梨酸产生干扰，通过对

比流量分别为1.0，1.1，1.2，1.3，1.4，1.5 m L·min-1的分析结果，当流量小

于1.2 m L·min-1时，山梨酸可被有效地分离，试验选择流量为1.1 mL·min-1。

山梨酸和苯甲酸的色谱峰时间分别为6.254，9.214 min，混合标准溶液的色谱分

离图见图1。

2.3 标准曲线及检出限

配制一系列混合标准溶液，按试验方法进行测定，结果表明：山梨酸和苯甲酸的质

量浓度在0.5～50 mg·L-1范围内与峰面积呈线性关系，线性回归方程和相关系数

见表1。

以3倍信噪比（3S／N）计算方法的检出限，见表1。

2.4 精密度和回收试验

在已知不含山梨酸和苯甲酸的葡萄酒样品溶液中加入一定量的混合标准溶液，加标

水平为5，10，25 mg·L-1，按试验方法提取、净化和检测，重复试验6次，以峰

面积计算这两种食品添加剂的回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表2。

2.5 方法对比

按试验方法对两份阳性的葡萄酒样品溶液进行测定，同时与GB／T 5009.29-

2003方法的测定结果进行对比，其中苯甲酸均未检出，山梨酸的测定结果见表3。

本工作建立了离子色谱法同时测定葡萄酒中山梨酸和苯甲酸食品添加剂的含量，样

品的预处理简单，操作简便，采用外标法定量，与现行的国家标准方法进行对比时，

测定结果的相对偏差在5%以内，

满足日常的检测要求。

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